玻璃化冷凍小鼠囊胚的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文玻璃化冷凍小鼠囊胚的實(shí)驗(yàn)研究姓名：方明珠申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師：譚麗20060501鄭州大學(xué)2006屆碩士畢業(yè)論文玻璃化冷凍小鼠囊胚的實(shí)驗(yàn)研究(摘要)冷凍保存方法奠定實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。材料與方法(1)應(yīng)用三種不同冷凍載體玻璃化冷凍小鼠囊胚，選用小鼠的早期囊胚，將各胚胎隨機(jī)分為四組：①普通麥管組、③拉細(xì)麥管(cPs)組、⑧冷凍環(huán)組、④對(duì)照組，以55mol／l乙二醇lmol／1蔗糖為主要組成的玻璃化冷凍液，分

2、別應(yīng)用普通麥管玻璃化冷凍小鼠早期囊胚129個(gè)、cPs冷凍小鼠早期囊胚118個(gè)。以15％二甲基亞砜15％乙二醇_Fic011400(10mg／mL)065mol／1蔗糖為主要組成的玻璃化冷凍液，應(yīng)用冷凍環(huán)冷凍小鼠囊胚125個(gè)，以同期未冷凍早期囊胚作對(duì)照(110個(gè))，觀察冷凍復(fù)蘇后胚胎存活率及繼續(xù)發(fā)育能力。(2)應(yīng)用冷凍環(huán)玻璃化冷凍小鼠的囊胚，胚胎按發(fā)育階段分為4組：①早期囊胚組；②囊胚組：③擴(kuò)張囊胚：④對(duì)照組。應(yīng)用冷凍環(huán)以15％二甲基亞砜

3、15％乙二醇Fic011400(10mg／mL)O65mol／1蔗糖為主要組成的玻璃化冷凍液，冷凍小鼠早期囊胚112個(gè)、囊胚120個(gè)、擴(kuò)張囊胚105個(gè)，以同期未冷凍囊胚作對(duì)照(100個(gè))，觀察冷凍復(fù)蘇后胚胎存活率及繼續(xù)發(fā)育能力。(3)人工皺縮后玻璃化冷凍小鼠擴(kuò)張囊胚，選用小鼠擴(kuò)張囊胚，將其隨機(jī)分為：①人工皺縮組、②未皺縮組、③對(duì)照組(同期新鮮未冷凍的擴(kuò)張囊胚)。應(yīng)用冷凍環(huán)以15％二甲基亞砜15％乙二醇Ficoll400(10mg／mL)

4、065mol／1蔗糖為主要組成的玻璃化冷凍液，冷凍小鼠擴(kuò)張期囊胚150個(gè)，凍前先應(yīng)用自制的玻璃微細(xì)管進(jìn)行人工縮小小鼠囊胚腔后，再應(yīng)用冷凍環(huán)玻璃化冷凍小鼠擴(kuò)張期囊胚，凍融后培養(yǎng)3h觀察胚胎存活情況，設(shè)同期培養(yǎng)的新鮮擴(kuò)張囊胚loo個(gè)為對(duì)照，并將存活胚胎及新鮮未凍囊胚移植受體孕鼠子宮內(nèi)，觀察胚胎的妊娠率和產(chǎn)仔率。數(shù)據(jù)應(yīng)用統(tǒng)計(jì)軟件ExcEL及sPssl20進(jìn)行處理，兩組樣本率之間的比較采用z2檢驗(yàn)和Fisher’s精確概率法。檢驗(yàn)水準(zhǔn)n=005