復(fù)方心腦腎康對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷干預(yù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本文主要從以下幾部分展開： 第一部分： 目的：篩選復(fù)方心腦腎康的最佳組方并建立質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法：采用體外心肌組織抗氧化損傷的正交設(shè)計(jì)法，以各組分對(duì)MDA抑制率為檢測(cè)指標(biāo)，將茶多酚、銀杏葉提取物、三七總皂苷、丹參四種活性提取成分有機(jī)組方制成復(fù)方心腦腎康(XNSK)；應(yīng)用薄層色譜方法(TLC)對(duì)TP、Egb761、PNS、DS進(jìn)行了定性鑒別；應(yīng)用高效液相色譜方法(HPLC)測(cè)定XNSK中EGCG含量，并且通過結(jié)果制定膠囊中EG

2、CG的最低標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果：初步篩選出對(duì)心肌缺血起保護(hù)作用的XNSK最佳組方；在薄層色譜中，四個(gè)組分分別以不同展開劑展開后均呈單一斑點(diǎn)，其Rf值分別為0.43、0.59、0.61、0.45；在高效液相色譜中，以外標(biāo)法計(jì)算XNSK中EGCG含量，得制劑中EGCG含量應(yīng)不低于197.76mg/g，通過實(shí)驗(yàn)結(jié)果建立了XNSK的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)論：本課題組初步篩選出XNSK的最佳組方；XNSK中EGCG的含量不低于197.76mg/g即可達(dá)到該制劑的質(zhì)量

3、標(biāo)準(zhǔn)，表明分析方法合理、可行，復(fù)方的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)可以控制。 第二部分： 目的：探討復(fù)方心腦腎康防治急性心肌缺血再灌注損傷的干預(yù)作用和可能機(jī)制。方法：利用Wistar大鼠結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支30min后放松60min復(fù)制缺血再灌注損傷模型，同時(shí)采用心內(nèi)插管技術(shù)檢測(cè)大鼠心臟血流動(dòng)力學(xué)；通過測(cè)定多項(xiàng)生化指標(biāo)來探討藥物抗損傷的可能機(jī)制；測(cè)定AST、LDH、LDH-1、CK、CK-MB的含量了解XNSK對(duì)心肌酶學(xué)的影響；測(cè)定各組ADP

4、誘導(dǎo)的血小板聚集抑制率了解其對(duì)微循環(huán)的影響機(jī)制；病理切片觀察心肌組織形態(tài)學(xué)的改變及電鏡下觀察了心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化；并觀察了凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2和Bax表達(dá)的情況。結(jié)果：與模型組相比較，XNSK能使心率(HR)、左心室收縮壓(LVSP)、左室內(nèi)壓最大上升速率(+dp/dtmax)、左室內(nèi)壓最大下降速率(-dp/dtmax)升高，降低左心室終末舒張壓(LVEDP)，并有一定的劑量依賴關(guān)系；SOD活力和ATP酶含量明顯高于模型組(P＜0

5、.05)，而MDA、ROS、NOS含量明顯低于模型組(P＜0.05)，均呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系；能降低ADP誘導(dǎo)的血小板聚集抑制率；觀察發(fā)現(xiàn)XNSK使缺血再灌注心肌細(xì)胞的組織形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)受損傷程度減輕；心肌Bax蛋白表達(dá)明顯減少(P＜0.05)，對(duì)Bcl-2蛋白表達(dá)明顯增加(P＜0.01)，并能顯著降低Bax/Bcl-2的比值(P＜0.05)。結(jié)論：心腦腎康對(duì)急性心肌缺血再灌注損傷具有防治作用，其作用機(jī)制可能與抗脂質(zhì)過氧化物損傷、抑制血小