浙江地區(qū)非結(jié)核分枝桿菌在疑似肺結(jié)核患者中的流行研究.pdf

1、本文從以下幾部分進(jìn)行論述：
　　第一部分 浙江地區(qū)非結(jié)核分枝桿菌在疑似肺結(jié)核患者中的流行研究
　　非結(jié)核分技桿菌(Nontuberculous mycobacteria, NTM)是抗酸染色陽性的分技桿菌，在近幾年獲得了越來越多的關(guān)注。因為世界各地區(qū)的研究發(fā)現(xiàn)，NTM的發(fā)病率在普遍上升;而且作為環(huán)境中廣泛存在的細(xì)菌，NTM可以在免疫缺陷患者中引起嚴(yán)重的感染性疾病，累及肺部，皮膚，軟組織，骨髓等部位，并常常被誤診為結(jié)核病。作者

2、所在課題組，從2011年初開始在浙江省傳染病防治示范區(qū)收集從疑似肺結(jié)核患者的痰標(biāo)本中培養(yǎng)得到的分枝桿菌菌株，到2013年底已收集了1831位患者的1953株抗酸染色陽性細(xì)菌，從中鑒定出113株NTM，來自于100位患者。本研究據(jù)此對這些分枝桿菌標(biāo)本中的NTM菌株和患者進(jìn)行了研究。
　　目的：
　　為了調(diào)查疑似肺結(jié)核患者中的NTM感染的流行情況，以及患者的一般情況、臨床表現(xiàn)、死亡相關(guān)因素、社會經(jīng)濟(jì)學(xué)因素和NTM菌株的耐藥情況，

3、在位于我國東南沿海地區(qū)的浙江省展開了本研究。
　　方法：
　　從2011年1月1日起到2013年12月31日止，通過浙江省示范區(qū)的結(jié)核病監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)，收集到來源于100位患者的113株NTM菌株。所有菌株均進(jìn)行了分枝桿菌菌種鑒定芯片的鑒定和基因測序以獲得確認(rèn)，并進(jìn)行了相關(guān)抗生素的體外液體微量稀釋法藥敏試驗。
　　結(jié)果：
　　2011年NTM從抗酸染色陽性的分枝桿菌標(biāo)本中的檢出率為5.0％，2012年為6.1％，201

4、3年為6.2％(P＞0.5)。2011年、2012年及2013年浙江省示范區(qū)的NTM肺部感染的發(fā)生率分別為3.29/10萬(95％CI:1.12-9.69)，4.24/10萬(95％CI1.64-10.98)，3.33/10萬(95％CI:1.14-9.75)。感染者主要包括三類人群:中低收入的中老年男性，流動的從事體力勞動的年輕男性，患有肺氣腫等基礎(chǔ)肺部疾病的中老年女性。分離和鑒定得到的主要菌種包括胞內(nèi)分枝桿菌，鳥分枝桿菌，堪薩斯分枝

5、桿菌和膿腫分枝桿菌。經(jīng)體外藥敏試驗發(fā)現(xiàn)，膿腫分枝桿菌對多種抗生素有很高的耐藥比率，所有的堪薩斯分枝桿菌都對利福平敏感，所有的胞內(nèi)分枝桿菌和鳥分枝桿菌都對克拉霉素敏感。
　　結(jié)論：
　　浙江地區(qū)流行的NTM主要包括四種:胞內(nèi)分枝桿菌，烏分枝桿菌，堪薩斯分枝桿菌和膿腫分枝桿菌。三類主要的感染人群說明，NTM的肺部感染的發(fā)生可能和個體的工作環(huán)境、生活環(huán)境以及肺部基礎(chǔ)疾病具有密切聯(lián)系。因為浙江地區(qū)的膿腫分枝桿菌對常用抗生素具有較高的

6、耐藥率，所以在對NTM肺病的患者進(jìn)行抗分枝桿菌的抗生素治療以前，需要對致病的NTM進(jìn)行菌種鑒定，并進(jìn)行體外藥敏試驗，采用敏感抗生素的聯(lián)合治療方案進(jìn)行治療。
　　第二部分 浙江地區(qū)胞內(nèi)分枝桿菌的ERIC-PCR基因圖譜分析
　　ERIC-PCR(Enterbacterial Repetitive Intergenic Consensus-Polymerase ChainReaction)擴(kuò)增得到的細(xì)菌DNA主要包含基因間的重復(fù)

7、保守性序列，可以結(jié)合聚類分析方法用來研究同種不同株的細(xì)菌間的同源性關(guān)系。
　　目的：
　　目前沒有胞內(nèi)分枝桿菌可以直接在人與人之間傳播和感染的研究證據(jù)。因此我們假設(shè)在浙江地區(qū)流行的胞內(nèi)分枝桿菌具有高度不同源性，并通過ERIC-PCR對收集的38株胞內(nèi)分枝桿菌進(jìn)行了研究和分析。
　　方法：
　　從2011年1月1日起到2012年12月31日止，收集到來源于36位患者的37株胞內(nèi)分枝桿菌和1株胞內(nèi)分枝桿菌標(biāo)準(zhǔn)株并進(jìn)行

8、ERIC-PCR。
　　結(jié)果：
　　每株細(xì)菌都有擴(kuò)增產(chǎn)物，產(chǎn)物大小介于100bp-2000bp，條帶數(shù)目介于3-12條。38株胞內(nèi)分枝桿菌的ERIC-PCR指紋圖譜具有程度不一的差異，沒有條帶完全相同的指紋圖譜
　　結(jié)論：
　　ERIC-PCR是可以被用來對胞內(nèi)分枝桿菌進(jìn)行分子分型和同源性檢測的實驗技術(shù)。浙江地區(qū)流行的胞內(nèi)分枝桿菌的同源性程度很低。
　　第三部分 多重耐藥非結(jié)核分枝桿菌致多發(fā)性骨髓炎病例的研

9、究報道
　　非結(jié)核分枝桿菌(Nontuberculous mycobacteria，NTM)是近年來獲得重視和關(guān)注的一類重要的機(jī)會性致病菌，不僅可以感染肺部，還可以累及骨髓、皮膚、淋巴結(jié)等全身多處器官，在免疫缺陷患者中造成后果嚴(yán)重的感染。但是因為發(fā)病率低，所以長期未獲得重視和了解。
　　糖尿病患者也屬于免疫缺陷的人群，因此由各種病原菌引起的骨髓炎也是糖尿病患者中一類重要的并發(fā)癥，但是世界范圍內(nèi)的已發(fā)表文獻(xiàn)中只有很少的病例報道

10、是關(guān)于糖尿病患者中發(fā)生的NTM骨髓炎。在這個病例報道中，我們報告了一例69歲的來自浙江地區(qū)的男性糖尿病患者，先被診斷為結(jié)核性骨髓炎。后來借助基因芯片技術(shù)被確診為胞內(nèi)分枝桿菌感染引起的全身多發(fā)性的骨髓炎，并通過體外藥敏試驗和23S-rDNA直接測序技術(shù)確認(rèn)發(fā)生了對大環(huán)內(nèi)酯類抗生素耐藥的突變。盡管如此，多種抗生素的聯(lián)合治療方案在這個病人身上仍然取得了控制感染的效果。在討論部分我們進(jìn)行了文獻(xiàn)檢索，根據(jù)目前世界范圍內(nèi)的英語文獻(xiàn)情況對糖尿病患者中