消退素D1對非壓迫性腰椎間盤突出癥模型大鼠根性神經痛的作用研究.pdf

1、背景：
　　腰椎間盤突出癥患者是腰腿痛患者的主要來源之一，該病所致的腰痛和神經根性痛是患者最主要的痛苦，極大地影響了患者的生活質量。腰椎間盤突出癥所致的腰痛和神經根性痛發(fā)病的多源性也越來越受到人們的重視，除了機械壓迫外，化學物質刺激，神經系統的炎性反應與免疫反應，以及疼痛感受器致敏等均參與了腰痛及神經根性痛的發(fā)生。髓核作為一種正常的間盤組織存在于機體內，一旦纖維環(huán)破裂，髓核突出暴露于機體的免疫系統，將會激發(fā)神經系統強烈的自身免疫反

2、應和炎癥改變，引起白細胞的活化和滲透、炎癥細胞因子釋放以及神經細胞變性，最終導致脊髓傷害感受性神經元的激活，引起神經病理性疼痛。
　　消退素(resolvin)是一種由ω-3多不飽和脂肪酸衍生的新型促炎癥消退介質。具有阻礙白細胞浸潤、下調炎癥介質、促進凋亡的中性粒細胞及細胞碎片的吞噬攝取等功效，在炎癥早期促進炎癥的及時消退。目前大量研究已經證實，消退素在多種炎性疾病如:哮喘、膿毒癥、牙周病及視網膜病變等，顯示出了良好的抗炎促消退作

3、用。此外，新近研究還發(fā)現，消退素對于一些炎性和神經病理性疼痛的模型大鼠也發(fā)揮了顯著的鎮(zhèn)痛效應。然而消退素在腰椎間盤突出所致的大鼠根性神經痛模型中的作用，卻鮮有報道。本研究在建立非壓迫性腰椎間盤突出癥模型大鼠的基礎上，探討消退素D1(Resolvin D1，RvD1)對根性神經痛的作用及內在機制。
　　目的：
　　本研究通過建立非壓迫性腰椎間盤突出癥模型大鼠，采用鞘內給藥的方式，探討RvD1對大鼠疼痛反應及神經根炎癥的作用及內

4、在機制。
　　方法：
　　1.將152只大鼠按隨機數字法平均分成4組:假手術組（假手術+10μl PBS）、模型組（模型+10μl PBS）、RvD110ng組（模型+10μl RvD110 ng）、RvD1100ng組(模型+10μl RvD1100 ng)，每組38只。建立非壓迫性腰椎間盤突出癥大鼠模型，于術后連續(xù)3天鞘內注射RvD1或PBS10μl。
　　2.術前1d及術后第1、2、3、4、7、10、21d觀察并

5、記錄各組大鼠術側50％縮足閾值(paw withdrawal threshold， PWT)。術后第7d，取各組大鼠術側脊髓背角(L4-L6)及L5背根神經節(jié)(dorsal root ganglion，DRG)，通過RT-PCR(real-timepolymerase chain reaction)和ELISA(enzyme-linked immune sorbent assay)技術測定各組大鼠脊髓背角中炎性因子TNF-α(tumor

6、 necrosis factor-α)、IL-1β(interleukin-1β)、IL-10(interleukin-10)和TGF-β1(Transforming growth factor-β1)mRNA及蛋白的含量;應用ELISA技術檢測L5 DRG中炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-10和TGF-β1蛋白的含量。此外，利用Western blot技術檢測各組大鼠術側脊髓背角中NF-κB/p65(Nuclear factor

7、-κB/p65)和ERK(Extracellular signal-regulatedkinase，p-ERK、t-ERK)通路蛋白的表達量;應用免疫組化技術檢測術側脊髓背角及L5 DRG中NF-κB/p65和p-ERK陽性細胞表達量。
　　結果：
　　術前1d至術后21d的觀察期內，術后各時間點模型組大鼠50％PWT較假手術組明顯降低;鞘內注射消退素RvD1(10ng or100ng)能明顯升高大鼠術側50％PWT。非壓迫

8、模型建模后第7d，模型組大鼠脊髓背角和DRG中TNF-α和IL-1β的表達較假手術組明顯升高，IL-10和TGF-β1的表達較假手術組明顯降低;鞘內給予RvD1(10ng or100ng)能明顯降低大鼠脊髓背角及DRG中的TNF-α和IL-1β水平，升高IL-10和TGF-β1的表達水平，且呈劑量依賴性。非壓迫模型建模后第7d，模型組大鼠脊髓背角中NF-κB/p65、p-ERK蛋白水平較假手術組明顯升高，脊髓背角及DRG中NF-κB/p

9、65及p-ERK陽性細胞表達量明顯升高;鞘內注射RvD1(10ng or100ng)后，大鼠脊髓背角NF-κB/p65、p-ERK蛋白水平明顯降低，脊髓背角及DRG中NF-κB/p65、p-ERK陽性細胞表達量明顯減少，且呈劑量依賴性。
　　結論：
　　鞘內給予消退素RvD1后，非壓迫性腰椎間盤突出癥模型大鼠的根性神經痛明顯減輕，脊髓背角及DRG中促炎因子(TNF-α和IL-1β)明顯減少、抗炎因子(TGF-β1和IL-10