丹參注射液對慢性胰腺炎的治療作用.pdf

1、目的：慢性胰腺炎（CP）是由于胰腺實質(zhì)的反復(fù)性或持續(xù)性炎癥導(dǎo)致的胰腺實質(zhì)和胰管進行性的不可逆的損害和纖維化，主要癥狀有腹痛，消瘦，糖尿，黃疸及脂肪瀉，并表現(xiàn)出不同程度的胰腺內(nèi)外分泌功能減退或喪失。慢性胰腺炎的形態(tài)學(xué)特征是胰腺組織的進行性纖維化，典型的病理改變是胰腺組織縮小，呈不規(guī)則結(jié)節(jié)樣變硬，常伴有胰腺組織鈣化、或有腺泡萎縮，胰腺導(dǎo)管節(jié)段性擴張，其內(nèi)可有結(jié)石及假性囊腫形成，伴有胰島細(xì)胞的減少或萎縮。其病理生理過程較為復(fù)雜，主要是由于胰腺

2、組織中以膠原為主的細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)合成與沉淀增加，降解減少，兩者失去動態(tài)平衡所致。本實驗是通過測量層粘連蛋白（LN）和透明質(zhì)酸（HA），從而驗證丹參對慢性胰腺炎的治療作用以及不同劑量組的丹參注射液對慢性胰腺炎的治療效果。本實驗采用光度酶聯(lián)免疫分析法（ELISA）檢測SD大鼠胰腺正常組、慢性胰腺炎對照組、丹參注射液干預(yù)小劑量組、丹參注射液干預(yù)中劑量組、丹參注射液干預(yù)大劑量組中的LN及HA含量，進行比較分析，并觀察大鼠慢性胰腺炎胰腺組織

3、的病理學(xué)變化，以初步探討丹參注射液對慢性胰腺炎胰腺纖維化的治療作用。
　　 方法：SD大鼠隨機方法等分成5組，每組10只，分別為正常組、模型正常組、低劑量丹參干預(yù)組（400mg/kg）、中劑量丹參干預(yù)組（800mg/kg）、大劑量丹參干預(yù)組（1600mg/kg）。除正常組外，其余4組大鼠術(shù)前禁食不進水12h,胺碘酮（100mg/kg體重）腹腔注射麻醉，大鼠固定后常規(guī)消毒，沿腹白線做正中切口，41/2號靜脈頭皮針穿刺膽胰管后，夾閉

4、胰膽管近肝門端，通過恒流泵向十二指腸乳頭注射2％三硝基苯磺酸（TNBS）乙醇磷酸鹽緩沖液0.4ml，1h注完，關(guān)閉恒流泵后維持壓力10min,以防藥物回流，逐層關(guān)閉腹腔，手術(shù)過程嚴(yán)格無菌操作。為防止大鼠脫水，每天皮下注射生理鹽水3次，每次5ml,直至大鼠能自由飲水。術(shù)后禁食72h后給予常規(guī)飲食。于術(shù)后72h用不同劑量的丹參注射液肌肉注射至術(shù)后4周。分別處死各組大鼠，抽血留取血清，-20℃保存；取胰腺組織，用福爾馬林溶液固定。實驗前將血清

5、置室溫復(fù)溶, 轉(zhuǎn)離心, 取上清液進行測定。采用光度酶聯(lián)免疫分析法（ELISA）檢測胰腺正常組、對照組、干預(yù)組中的LN和HA的含量，并用HE染色法觀察慢性胰腺炎組織中纖維化的變化。
　　 結(jié)果：對照組大鼠慢性胰腺炎胰腺組織明顯病理變化。胰管內(nèi)注射2％三硝基苯磺酸后發(fā)現(xiàn)胰腺組織立即充血腫脹，4周后處死大鼠，取出胰腺組織，可見胰腺體積明顯變小，質(zhì)地硬化，且與周圍組織分界模糊不清，高倍鏡下可見胰腺間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤,大量纖維組織增生，致密

6、的膠原和成纖維細(xì)胞增生將胰島細(xì)胞分割；胰泡細(xì)胞缺失及部分腺泡空泡樣變，胞體皺縮鈣化，胰管增生擴張，管周纖維組織增生, 管周及胰腺小葉間和小葉內(nèi)纖維化伴大量炎癥細(xì)胞浸潤。丹參干預(yù)組中亦發(fā)生胰腺纖維化，但丹參干預(yù)組較模型組纖維化程度明顯減輕，且隨著丹參注射液劑量的增加胰腺纖維化程度呈逐步減輕的趨勢。將五組大鼠胰腺組織病理切片進行纖維化評分，發(fā)現(xiàn)對照組評分高于丹參干預(yù)組，纖維化程度較高。ELISA法測試表明：干預(yù)組中LN和HA的含量明顯低于對