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
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1、目的:慢性胰腺炎是由于膽道疾病或酒精中毒等因素導(dǎo)致的胰腺實(shí)質(zhì)進(jìn)行性損害和纖維化,常伴鈣化、假性囊腫及胰島細(xì)胞減少或萎縮。其病理生理過(guò)程復(fù)雜,以胰腺內(nèi)成纖維細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)在胰腺組織內(nèi)過(guò)多沉積為其特征。傳統(tǒng)的慢性胰腺炎胰腺纖維化指標(biāo)是層粘連蛋白(LN)的含量升高及超氧化物歧化酶(SOD)活性降低。我們采用光度酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)檢測(cè)SD大鼠胰腺正常組、慢性胰腺炎對(duì)照組、黃芪注射液干預(yù)小劑量組、黃芪注射液干預(yù)中劑量組、黃芪
2、注射液干預(yù)大劑量組中的LN的含量及SOD的活性進(jìn)行比較分析,觀察大鼠慢性胰腺炎胰腺組織的病理學(xué)變化,以初步探討黃芪注射液對(duì)慢性胰腺炎胰腺纖維化的治療作用。
方法:SD大鼠隨機(jī)方法等分成5組,每組10只,分別為正常組、對(duì)照組、低劑量黃芪注射液干預(yù)組(400mg/kg)、中劑量黃芪注射液干預(yù)組(800mg/kg)、大劑量黃芪注射液干預(yù)組(1600mg/kg)。除正常組外,其余4組大鼠術(shù)前禁食12h,胺碘酮(100 mg/kg體
3、重)腹腔注射麻醉,沿腹白線做正中切口,夾閉胰膽管近肝門端,通過(guò)恒流泵向十二指腸乳頭注射2%TNBS乙醇磷酸鹽緩沖液0.4ml,1h注完,關(guān)閉恒流泵后維持壓力10min,以防藥物回流,手術(shù)過(guò)程嚴(yán)格無(wú)菌操作。為防止大鼠脫水,每天皮下注射生理鹽水2次,每次6ml,直至大鼠能自由飲水。術(shù)后禁食72h后給予常規(guī)飲食。于術(shù)后72h用不同劑量的黃芪肌肉注射至術(shù)后28天。所有觀察對(duì)象抽取靜脈血,分離血清,置于-20℃低溫冰箱中備用。實(shí)驗(yàn)前將血清置室溫復(fù)
4、溶,轉(zhuǎn)離心,取上清液進(jìn)行測(cè)定。采用光度酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)檢測(cè)胰腺正常組、對(duì)照組、干預(yù)組中的LN的含量。SOD試劑盒采用黃嘌呤氧化酶法測(cè)其總活力。用HE染色法觀察慢性胰腺炎組織中纖維化的變化。
結(jié)果:對(duì)照組大鼠慢性胰腺炎胰腺組織明顯病理變化。模型組大鼠造模4周后,可見(jiàn)胰腺間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤(rùn),管周纖維組織增生,胰管增生擴(kuò)張,管周及胰腺小葉間和小葉內(nèi)纖維化伴炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),局部腺體萎縮壞死,腺泡空泡樣變。黃芪注射液干預(yù)組較
5、模型組纖維化程度明顯減少。將五組大鼠胰腺組織病理切片進(jìn)行纖維化評(píng)分,發(fā)現(xiàn)模型組大鼠慢性胰腺炎胰腺纖維化程度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于干預(yù)照組慢性胰腺炎胰腺纖維化,有顯著差異。SD大鼠正常組與對(duì)照組比較,對(duì)照組發(fā)生明顯的胰腺纖維化,LN的含量明顯升高,SOD活性明顯降低。黃芪注射液干預(yù)組中胰腺纖維化程度減輕,黃芪注射液小中大劑量干預(yù)組均使LN含量降低,SOD活性顯著升高。
結(jié)論:黃芪注射液具有抗大鼠慢性胰腺炎胰腺組織纖維化的作用。通過(guò)黃芪注射
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