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文檔簡介
1、山東師范大學碩士學位論文NaCl和KCl脅迫對堿蓬生長及液泡膜質子泵活性的效應姓名:楊明峰申請學位級別:碩士專業(yè):植物學指導教師:王寶山2002.4.30NaCI.1IKCI助邊刀粼庵士炙及腸觸裂質子刃活世功戎應NaCI和KCl脅迫對堿蓬生長及液泡膜質子泵活性的效應楊明峰(山東師范大學生命科學院250014)2002.4.18摘要在鹽漬條件下,堿蓬的根和地上部分在生長、離子積累、質子泵活性、VH十一ATPase伽退的表等幾個方面存在明顯
2、差異,表明鹽脅迫下地上部分和根在耐鹽方面的作用和耐鹽機理不同,顯著差別刁鹽生植物堿二者共同影響著植物的耐鹽性。NaCl和KCl對堿蓬上述各方面的效應也有本實驗目的是研究NaCl和KCl對堿蓬生長及液泡膜質子泵活性的效應,以蓬為材料分別用NaCl和KCl處理,測定根和地上部分的有關生理指標,通過蔗糖密度梯度離心提取了堿蓬根和地上部分的液泡膜微囊,測定了VHATPaseVHPPase活性,并進行Westernblot分析以確定VHATPas
3、e各亞基表達情況,主要結果如下:1NaCI處理對堿蓬根和地上部分生長和液泡膜質子泵的效應r八.1生長和離子積累從堿蓬地上部分鮮重和干重變化趨勢看,低鹽脅迫(200mmolL)明顯促進堿蓬地上部分的生長,高鹽脅迫(400mmoULNaCl)與低鹽脅迫相比抑制堿蓬地上部分的生長在各種濃度的鹽脅迫條件下,根的生長受鹽脅迫影響小,說明了鹽脅迫下地上部分生長變化大,而根在鹽脅迫下保持穩(wěn)定。根的肉質化程度遠低于地上部分,但是根在鹽處理下肉質化程度也
4、增加。堿蓬用正常Hoagland培養(yǎng)液培養(yǎng)時有聚Na作用,根吸收的大部分Na運往地上部分積累起來,可以作為滲透調節(jié)劑,增強吸水能力。鹽脅迫下,ClNa主要積累在地上部分,大約有97%的Na積累在地上部分,根只占3%,因而地上部分細胞汁液滲透勢大大低于根。由于堿蓬的根鮮重占整株鮮重的110左右,而且鹽脅迫下無機鹽相對含量很低,所以堿蓬的地上部分是積累鹽的主要部位,根在抗鹽中的作用不在于積累無機鹽。在非鹽脅迫條件下堿蓬地上部分除了選擇K作為
5、滲透調節(jié)劑以外,Na也作為一種重要滲透調節(jié)劑,根傾向于選擇K十作為滲透調節(jié)劑。1.2液泡膜質子泵活性與亞基表達堿蓬根和地上部分VHATPase的亞基有差異。從地上部分的VHATPase中檢測到66kDa55kDa36kDa和18kDa等4種亞基根只顯示1種亞基(18kDa),其余3個亞基與本實驗所用抗體無明顯反應??梢?,根和地上部分VHATPase的組成性構成不同,存在異構現(xiàn)象“soform),也有可能是有其他三種亞基雖然相同但是蛋白量
6、很少。200mmolLNaCl脅迫后,地上部分VHATPase各亞基的數(shù)目及種類沒有變化,表達量明顯增加,各亞基增加幅度相似。根內VHATPase的18kDa亞基也明顯受鹽刺激而表達增加,與地上部分不同的是,根的印跡圖上出現(xiàn)一個新膚段(16kDa),可能是18kDa亞基的降解產(chǎn)物.NaCl脅迫后,地上部分VHATPase各亞基表達量明顯增加,其水解活性也相應增加,由于沒有新亞基的出現(xiàn)而且鹽脅迫后亞基表達形式相同,所以VHATPase水解
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