高骨橋蛋白水平對雙足直立鼠脊柱側(cè)凸發(fā)生率和嚴(yán)重程度的影響及動物模型建立相關(guān)研究.pdf

1、一、研究目的：
　　青少年特發(fā)性脊柱側(cè)凸(adolescent idiopathic scoliosis，AIS)是一種定義為十歲左右起病，并且沒有潛在的致病原因支持其發(fā)生及進展的一類脊柱三維畸形，女性較男性多發(fā)。目前AIS的病因和發(fā)病機制仍然缺乏足夠的認識，盡管提出大量的假設(shè)，但尚未得到明確的論證。近年來相關(guān)研究揭示骨橋蛋白(osteopontin，OPN)可能導(dǎo)致特發(fā)性脊柱側(cè)凸發(fā)生發(fā)展。因此，本課題擬建立高OPN水平雙足直立小

2、鼠，觀察評估高濃度OPN小鼠和對照組之間脊柱側(cè)凸發(fā)生率及嚴(yán)重程度的差異，并收集小鼠血清測量OPN濃度，驗證單純高OPN濃度是否能夠直接誘發(fā)脊柱側(cè)凸發(fā)生。此外，我們還建立了高濃度骨橋蛋白水平誘導(dǎo)的雌性雙足直立小鼠，并評估其側(cè)凸發(fā)生率及嚴(yán)重程度，論證其是否能作為新型藥物干預(yù)類AIS動物模型平臺。
　　二、研究方法：
　?。ㄒ唬┻x取體重相近的同周齡C3Heej雄性小鼠120只，隨機均分為3個組，其中2組于3周齡時行上肢及鼠尾切除術(shù)

3、，并分別腹腔注射高濃度OPN及生理鹽水，3組均通過特殊鼠籠誘導(dǎo)小鼠直立體態(tài)形成3個月，拍攝X線觀察比較各組小鼠脊柱側(cè)凸發(fā)生率及嚴(yán)重程度，同時收集小鼠血清，使用ELISA方法測定各組小鼠血清OPN濃度差異。
　　（二）選取體重相近的同周齡C3Heej雄性及雌性小鼠共80只，分為高OPN雌性組、高OPN雄性組、對照組雄性組及對照組雌性組4個組，每組各20只，同法誘導(dǎo)小鼠脊柱直立體態(tài)3個月，拍攝X線觀察比較各組小鼠脊柱側(cè)凸發(fā)生率及嚴(yán)重程

4、度。
　　三、研究結(jié)果：
　?。ㄒ唬?個月后高OPN雙足鼠組、對照雙足鼠組、對照四足鼠組血清OPN濃度分別為207.3±85.1 ng/ml、74.6±20.1 ng/ml、83.7±32.2 ng/ml，高濃度OPN組外周血內(nèi)OPN含量明顯升高。小鼠體長分別為（13.6±1.0）cm、（13.9±0.9）cm、（13.6±0.9）cm。平均Cobb角角度分別為（29.8±6.1）°、(20.1±4.4)°、（16.6±2.

5、9）°，側(cè)凸發(fā)生率分別為92.5％、52.1％、12.5％。各組小鼠體長未見明顯差異，高OPN雙足鼠組側(cè)凸發(fā)生率及嚴(yán)重程度較對照組明顯加重，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　?。ǘ└逴PN雌性雙足鼠組、高OPN雄性雙足鼠組、對照組雌性組、對照組雄性組Cobb角分別為（25.8±6.7）°、（20.9±6.8）°、（15.6±3.1）°、（17.1±4.5）°，側(cè)凸發(fā)生率分別為90％、80％、40％、45％。高OPN雌性組、高OPN雄性組相比

6、對照組之間，側(cè)凸發(fā)生率及嚴(yán)重程度差異有顯著性，高OPN雌性組較OPN雄性組脊柱側(cè)凸嚴(yán)重程度更重，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　四、結(jié)論：
　　本研究結(jié)果在動物模型上證實了高OPN水平可能在青少年特發(fā)性脊柱側(cè)凸的發(fā)病機制中發(fā)揮重要作用:其不僅提高了在雙足直立小鼠發(fā)生脊柱側(cè)凸的風(fēng)險，而且也與側(cè)凸曲度的進展密切相關(guān)，實驗結(jié)果證實高OPN是導(dǎo)致AIS發(fā)病及進展的重要因素;高濃度OPN水平誘導(dǎo)的雌性雙足直立小鼠其側(cè)凸發(fā)生率更高，側(cè)凸嚴(yán)重程度