大鼠骨髓內(nèi)皮祖細胞SPIO標記及檢測.pdf

1、背景：一些研究者利用超順磁性氧化鐵對血管內(nèi)皮祖細胞進行標記，但是，對于超順磁性氧化鐵標記血管內(nèi)皮祖細胞后，對其存活、增殖及凋亡是否有影響研究較少。
　　 目的：研究大鼠骨髓內(nèi)皮祖細胞 (endotheliAlprogenitor cells，EPCS)的分離、培養(yǎng)、SPIO 標記，SPIO對EPCS的標記效果及其對細胞存活、增殖以及凋亡的影響，為進一步實驗研究奠定基礎(chǔ)。
　　 方法：SD大鼠體重120g～150g，采用梯

2、度密度離心法和貼壁法獲取大鼠EPCS，采用25μg／mL SPIO對其標記，比較標記和未標記的EPCS：普魯士藍染色觀察鐵標記率；臺盼藍檢測細胞活力；MTT 法檢測細胞增殖活力；Calcein-AM／PI 染色檢測細胞活性及細胞膜完整性；AO／PI 染色檢測細胞凋亡率。
　　 結(jié)果與結(jié)論：分離培養(yǎng)EPCS7～10d，細胞集落相互連接，呈典型的鋪路石樣外觀。普魯士蘭染色顯示SPIO（25μg/mL，24 h）對細胞的標記率接近94

3、％；比較SPIO 標記及未標記的EPCS：細胞活力分別為94.34％±0.25％和95.33％±0.31％；MTT 法檢測兩組間相比差異無統(tǒng)計意學(xué)義(P>0.05)；Calcein-AM/PI 染色檢測細胞的活性和膜完整性，存活率分別為96％和97％；AO/PI 染色兩組細胞的凋亡率均為5％。采用梯度離心法從骨髓中分離單個核細胞，經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)可實現(xiàn)內(nèi)皮祖細胞的分離培養(yǎng)；25μg/mL濃度的SPIO細胞標記率高，對細胞毒性小，且不影響EPC