胚胎干細(xì)胞體外定向誘導(dǎo)分化模型的建立及其相關(guān)因子的鑒定.pdf

1、山東大學(xué)碩士學(xué)位論文胚胎干細(xì)胞體外定向誘導(dǎo)分化模型的建立及其相關(guān)因子的鑒定姓名：郭曉霞申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：發(fā)育生物學(xué)指導(dǎo)教師：張紅衛(wèi)賀福初2000.4.1胚胎干細(xì)肫體外定向量導(dǎo)分化輳型的建立覆其相關(guān)因子的l定擅要／細(xì)胞分化是生物體發(fā)育過程的重要事件，目前對其早期細(xì)胞決定及分化的分子機(jī)制仍不很了解，建立一個可靠有效的細(xì)胞模型將極大地促進(jìn)人們對細(xì)胞分化中分子調(diào)控機(jī)制的認(rèn)識與了解。胚胎干細(xì)胞(ES)是一種多潛能干細(xì)胞，在合適的培養(yǎng)條件下，

2、ES細(xì)胞可以定向誘導(dǎo)分化形成包括神經(jīng)細(xì)胞在內(nèi)的多種細(xì)胞類型，對于研究哺乳動物早期神經(jīng)發(fā)生及分化提供了良好的實(shí)驗(yàn)體系。維甲酸(retinoicacid，RA)是維生素A的衍生物，可抑制細(xì)胞生長、促進(jìn)細(xì)胞發(fā)育、導(dǎo)致細(xì)胞凋亡等?！槐狙芯坷肦A對Es細(xì)胞的誘導(dǎo)分化作用，建立了ES細(xì)胞的體外分化模型。利用該模型，應(yīng)用蛋白質(zhì)組研究技術(shù)，對細(xì)胞分化，主要是神經(jīng)分化的發(fā)生及調(diào)控機(jī)理進(jìn)行了初步的探索。l本課題首先建立了RA體外誘導(dǎo)Es細(xì)胞定向向神經(jīng)細(xì)胞

3、分化的模型；并利用此模型系統(tǒng)提取了4個不同分化時期細(xì)胞的總蛋白質(zhì)：即未分化的Es細(xì)胞、分化初期細(xì)胞、神經(jīng)分化啟動時期的細(xì)胞及神經(jīng)分化末期的細(xì)胞。應(yīng)用二維電泳技術(shù)(twodimensionalelectrophoresis，2DE)，我們首先初步建立了這4個分化時相的細(xì)胞的蛋白質(zhì)圖譜，并迸一步比較了它們之間蛋白質(zhì)圖譜的表達(dá)差異，對其中24個蛋白差異點(diǎn)進(jìn)行了肽質(zhì)量指紋譜的鑒定，初步確定了其中9種蛋白質(zhì)。其中4種蛋白屬于細(xì)胞骨架蛋白，即微管蛋