日本七鰓鰻CD9分子的基因克隆、表達(dá)以及免疫學(xué)活性研究.pdf

1、CD9分子是四次跨膜蛋白超家族的成員,目前研究證明,該分子在細(xì)胞粘附和機(jī)體免疫應(yīng)答中發(fā)揮著重要的作用。作為無(wú)頜類脊椎動(dòng)物的代表之一,日本七鰓鰻因其獨(dú)特的進(jìn)化地位而受到人們關(guān)注,成為脊椎動(dòng)物免疫系統(tǒng)起源與進(jìn)化研究的新型模式生物。目前在七鰓鰻體內(nèi),發(fā)現(xiàn)有多種與脊椎動(dòng)物免疫反應(yīng)以及細(xì)胞的分化、增殖、遷移和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)的同源基因的表達(dá),這些基因的發(fā)現(xiàn)對(duì)于揭示早期適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的起源具有重要意義。雖然有這么多相關(guān)基因的發(fā)現(xiàn),但是對(duì)于日本七鰓鰻而言

2、,其CD9分子的免疫相關(guān)功能尚不明確。在本篇論文中,作者通過(guò)檢索日本七鰓鰻白細(xì)胞cDNA文庫(kù),篩選CD9分子的EST序列,通過(guò)基因克隆得到了CD9基因的編碼區(qū)序列。日本七鰓鰻CD9基因的開(kāi)放閱讀框長(zhǎng)684 bp,編碼228個(gè)氨基酸,通過(guò)序列比對(duì)表明,它與其它物種中CD9基因具有較高的同源性。Real-time PCR以及免疫組化結(jié)果顯示,CD9基因在日本七鰓鰻組織中分布廣泛,在心臟中的豐度最高,在肝臟,鰓,腎等組織中也有不同程度的表達(dá)。

3、使用LPS免疫七鰓鰻后,其肝臟和心臟中CD9的mRNA表達(dá)水平呈顯著上調(diào)趨勢(shì),這表明CD9在這些組織中發(fā)揮著免疫調(diào)控的作用。免疫共沉淀的結(jié)果顯示,日本七鰓鰻CD9和CD29可以在腸里發(fā)生相互作用。流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示,CD9分子表達(dá)于日本七鰓鰻白細(xì)胞,并且在粒細(xì)胞中的表達(dá)水平要高于淋巴細(xì)胞,這預(yù)示著CD9分子可能在日本七鰓鰻的固有免疫應(yīng)答中發(fā)揮著更多的功能。本文研究結(jié)果表明,日本七鰓鰻CD9在各個(gè)組織中有著較為廣泛的分布并且在七鰓鰻的免疫