8-苯基黃嘌呤酰胺衍生物的設(shè)計(jì)、合成及其抑制MAO-B與抗腫瘤活性研究.pdf

1、目的
　　 以8-苯基黃嘌呤為母核進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾合成一系列衍生物，對其MAO-B抑制率、和抗腫瘤活性進(jìn)行研究。
　　 方法
　　 1．本文先采用帶有不同取代的苯甲酰氯、肉桂酰氯與對胺基苯甲酸或者間胺基苯甲酸在二氮甲烷中進(jìn)行?；磻?yīng)，得到中間體，然后用該中間體與合成的5，6-二氨基-1，3-二甲基脲嘧啶在EDAC催化下脫水形成酰胺鍵，再用氫氧化鈉在一定溫度下進(jìn)行環(huán)合，CH3I進(jìn)行甲基化合成目標(biāo)化合物。通過IR、1H-

2、NMR、ESI-MS對結(jié)構(gòu)進(jìn)行確認(rèn)。
　　 2．用蛋白含量測定試劑盒，加入不同濃度梯度的目標(biāo)化合物溶液抑制MAO-B，并以二氫嗅犬脲胺為底物與剩余MAO-B結(jié)合生成熒光物質(zhì)4-氫奎寧采，用熒光檢測法在242nm下測定其吸光值，間接計(jì)算出合成的化合物對MAO-B活性抑制能力。
　　 3．采用MTT法對目標(biāo)化合物在20μM濃度下對人結(jié)腸癌細(xì)胞HT-29，人子宮頸癌細(xì)胞Hela，結(jié)腸癌細(xì)胞株SW620，人肝癌細(xì)胞株HepG2的

3、抗腫瘤活性進(jìn)行初篩。對具有較好抑制率的部分化合物進(jìn)行濃度梯度測試計(jì)算出IC50值。
　　 結(jié)果
　　 1．合成12個(gè)未見文獻(xiàn)報(bào)道的新化合物(XD1-XD12)。目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)均經(jīng)過ESI-MS、IR、1H-NMR確認(rèn)。
　　 2．化合物進(jìn)行體外MAO-B抑制活性測試結(jié)果顯示：合成的目標(biāo)化合物均對MAO-B均有較好的抑制作用，其中化合物XD1、XD2、XD3、XD4抑制常數(shù)均較低。抑制能力最好的化合物XD1Ki=

4、0.52μM為8-（3-C1-苯基）咖啡因
　　 (Ki=36μM)的70倍。合成的化合物XD3、XD4對MAO-B的抑制作用要強(qiáng)于化合物XD9、XD10。同時(shí)目標(biāo)化合物間位氯取代對MAO-B的抑制有優(yōu)勢。而黃嘌呤7-位甲基化對MAO-B抑制活性影響不大。
　　 3．目標(biāo)化合物中XD1-XD8對四種腫瘤細(xì)胞的抑制作用不明顯，而XD9-XD12對四種腫瘤細(xì)胞都具一定的抑制生長作用，且這四個(gè)化合物隨著濃度增大，藥物作用增強(qiáng)，

5、呈現(xiàn)較好的劑量依賴性?；衔锏腎C50值接近陽性對照藥。
　　 結(jié)論
　　 1．合成的兩個(gè)系列的黃嘌呤衍生物為新化合物，結(jié)構(gòu)均經(jīng)過IR、1H-NMR、ESI-MS確認(rèn)。
　　 2．合成的化合物對MAO-B均有一定的抑制作用，其中黃嘌呤8-位采用苯甲酰氨基取代的化合物XD1、XD2、XD3、XD4對MAO-B的抑制常數(shù)均較低；這顯示苯甲酰氨基取代系列優(yōu)于苯乙烯甲酰氨基系列。比較XD3、XD4與XD5、XD6的抑制率

6、顯示：苯環(huán)有間氯取代對MAO-B的抑制有優(yōu)勢；而黃嘌呤7-位甲基化對MAO-B抑制活性影響不大。
　　 3．合成的化合物中XD9-XD12對人結(jié)腸癌細(xì)胞HT-29、人子宮頸癌細(xì)胞Hela、結(jié)腸癌細(xì)胞株SW620、人肝癌細(xì)胞株HepG2腫瘤細(xì)胞具有一定的抑制生長作用。這類化合物的共同點(diǎn)是采用了苯乙烯甲酰氨基取代。這提示我們苯乙烯甲酰氨基可能對腫瘤細(xì)胞的活性有影響。黃嘌呤類化合物作為抗腫瘤藥物的代謝后產(chǎn)物不能干擾、抑制RNA和DNA