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文檔簡介
1、目的:研究氯化鋰復(fù)合磷酸鈣骨水泥(Li/CPC)的理化性質(zhì)及體外生物活性,初步探究Li/CPC對成骨細(xì)胞增殖、分化能力的影響。
方法:材料學(xué)實驗:以磷酸鈣骨水泥(CPC)為空白對照組,不同鋰含量的Li/CPC為實驗組,檢測各組骨水泥理化性能及體外生物活性。用Gillmore雙針法測定骨水泥的初凝時間及終凝時間,用顯微CT(Micro-CT)檢測材料的孔徑分布和孔隙率,用電子動靜態(tài)萬能材料試驗機(jī)檢測材料的抗壓強(qiáng)度,用掃描電子顯微
2、鏡(SEM)觀察材料的微觀形貌,使用X射線衍射法(XRD)和傅里葉變換紅外光譜法(FTIR)檢測材料的組成成分及結(jié)構(gòu)。細(xì)胞學(xué)實驗:將骨水泥材料與MC3T3-E1細(xì)胞在體外共培養(yǎng),用SEM觀察細(xì)胞在骨水泥表面的粘附和生長形態(tài),用熒光電子顯微鏡觀察細(xì)胞骨架蛋白的染色,用CCK-8法檢測細(xì)胞增殖能力,用堿性磷酸酶(ALP)檢測試劑盒檢測ALP活性,用ALP染色和茜素紅染色法觀察細(xì)胞成骨分化及細(xì)胞外基質(zhì)礦化能力,用RT-PCR方法檢測I型膠原(
3、COLL-1)、骨鈣素(OCN)、骨保護(hù)素(OPG)、β-連環(huán)蛋白(β-Catenin)等成骨相關(guān)基因mRNA的表達(dá)情況。
結(jié)果:材料學(xué)實驗:鋰的摻雜未明顯改變CPC的理化性質(zhì),包括凝固時間、孔徑分布和孔隙率、抗壓強(qiáng)度、組成成分及微觀形貌。細(xì)胞學(xué)實驗:SEM結(jié)果表明MC3T3-E1細(xì)胞能夠很好地在材料表面粘附生長,熒光顯微鏡下觀察Li/CPC組細(xì)胞骨架較為飽滿,肌動蛋白較伸展,CCK-8實驗表明Li/CPC能夠促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖
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