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文檔簡(jiǎn)介
1、目的
肝臟缺血再灌注損傷是肝臟外科手術(shù)常見(jiàn)并發(fā)癥,可導(dǎo)致手術(shù)后較高的發(fā)病率和死亡率。研究發(fā)現(xiàn)丹紅注射液對(duì)多種器官組織的缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用。本實(shí)驗(yàn)將從肝功能、肝組織病理學(xué)變化以及炎癥反應(yīng)等方面來(lái)探討丹紅注射液預(yù)處理對(duì)大鼠肝缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。
方法
54只健康雄性SD大鼠,隨機(jī)分為3組:假手術(shù)組(Sham組)、缺血再灌注對(duì)照組(IR組)、缺血再灌注丹紅注射液預(yù)處理組(DH組),每組1
2、8只。DH組:腹腔內(nèi)注射丹紅注射液(3.2mL/kg/d),連續(xù)應(yīng)用3d,第3天手術(shù);Sham組和IR組:術(shù)前3d起腹腔內(nèi)注射相同劑量的生理鹽水,第3天手術(shù)。IR組和DH組:阻斷門(mén)靜脈、肝動(dòng)脈和膽總管20min后恢復(fù)肝臟血供,建立肝臟缺血再灌注損傷模型。Sham組:僅游離肝十二指腸韌帶,不阻斷肝臟血供。3組大鼠分別于再灌注后4h、12h、24h三個(gè)時(shí)點(diǎn)采集血液標(biāo)本用于檢測(cè)①血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)的
3、含量;②血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)的濃度;留取部分肝臟標(biāo)本用于①HE染色,光鏡下觀察肝組織病理學(xué)改變。②免疫組織化學(xué)染色觀察肝組織細(xì)胞間粘附分子-1(ICAM-1)的表達(dá)。
結(jié)果
1、 丹紅注射液預(yù)處理對(duì)肝臟缺血再灌注后肝功能的保護(hù)作用
IR組與Sham組比較,再灌注4h、12h、24h各時(shí)點(diǎn)血清ALT、AST的水平明顯升高,肝病理學(xué)損害嚴(yán)重,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P
4、<0.05);DH組與IR組比較,再灌注后各時(shí)點(diǎn)血清ALT、AST水平顯著降低,肝組織病理學(xué)損害顯著減輕,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
2、 丹紅注射液預(yù)處理對(duì)肝臟缺血再灌注后細(xì)胞因子的影響
IR組與Sham組比較,再灌注4h、12h、24h各時(shí)點(diǎn)血清TNF-α、IL-6水平均明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);DH組與IR組比較,再灌注各時(shí)點(diǎn)血清TNF-α、IL-6水平均顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)
5、意義(P<0.05)。
3、 丹紅注射液預(yù)處理對(duì)肝臟缺血再灌注后細(xì)胞間粘附分子表達(dá)的影響
免疫組化染色顯示:Sham組:肝組織ICAM-1表達(dá)呈陰性;IR組:肝組織ICAM-1表達(dá)顯著增加,在肝竇內(nèi)皮細(xì)胞和匯管區(qū)小動(dòng)脈肌層、小靜脈內(nèi)皮細(xì)胞呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá),部分肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞亦可見(jiàn)ICAM-1表達(dá)(P<0.01);DH組:肝竇內(nèi)皮細(xì)胞以及肝細(xì)胞表達(dá)ICAM-1明顯減少,與IR組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
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