參附注射液對大鼠移植肝臟缺血再灌注損傷保護作用的研究.pdf

1、目的：本文旨在從組織和細胞水平，探討參附注射液(Shenfuinjection，SF)對大鼠移植肝臟在缺血再灌注損傷(Ischemic reperfusioninjury，IRI)中的保護作用及其具體機制。 方法：采用72只健康雄性SD(Sprague Dawley)大鼠，重190～220g，將其隨機分為對照組和SF組(SF組受體在供肝植入門靜脈血流恢復后即經(jīng)尾靜脈一次性注射SF 1ml/100g，對照組以相同的方式注射等量的生

2、理鹽水)，每組18對，采用二袖套法進行原位肝移植。其中每組按門靜脈再灌注時間不同，又分為三組，分別于肝移植完成2h、4h和6h后收集受體的血清和肝組織，采用ELISA(酶聯(lián)免疫吸附)法測定血清中腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)的濃度，免疫組織化學法測定核因子κB(nuclear factor kappa B，NF-κB)的表達，原位雜交法測定細胞間粘附分子(intercellular adhe

3、sion molecule-1，ICAM-1)mRNA。另選用36只健康雄性SD大鼠，重180～210g，隨機分為對照組和SF組(SF組每孔細胞懸液滴加0.5mlSF，對照組每孔給予同等量生理鹽水)，其中每組按再氧化時間不同，又分為三組，分別進行原位肝臟灌注，所得細胞懸液進入缺氧-復氧模型(模擬體外IRI)。分別于復氧2h、4h和6h后取細胞懸液進行檢測。采用ELISA法測定ICAM-l的表達，免疫細胞化學法測定NF-κB的表達。

4、 結(jié)果：用于血清和組織學檢測的大鼠中，在肝移植完成后2h、4h和6h，SF組TNF-α濃度分別為(576±60pg/ml、518±52pg/ml和421±35pg/ml)，較對照組的濃度(831±65pg/ml、715±69pg/ml和598±52pg/ml)明顯低(P＜0.05)；同時，SF組組織的NF-κR和ICAM-lmRNA表達均明顯弱于對照組。在復氧2h、4h和6h后，SF組SEC的ICAM-1濃度分別為(444±3.4 p

5、g/ml、68±3.2 pg/ml和73±4.5pg/ml)，明顯低于對照組的(59±4.3 pg/ml、98±6.5 pg/ml和111±5.7pg/ml，P＜0.05)；SF組SEC的NF-κB表達明顯弱于對照組。 結(jié)論：SF能減輕IRI對移植肝臟特別是竇狀內(nèi)皮細胞的損傷，其機制是通過抑制肝組織中NF-κB的活化，有效下調(diào)TNF-α的分泌，降低ICAM-1的生成，從而減少白細胞對SEC的粘附，顯著改善微循環(huán)。本研究可為提高肝