姜黃素對大鼠局灶性腦缺血再灌注apoE及RXR、LXR表達的影響.pdf

1、目的：本研究旨在從在體實驗和離體實驗兩部分，分別觀察中藥姜黃素（ Curcumin， Cur）對在體實驗中大鼠局灶性腦缺血再灌注（ischemia/reperfusion，IR）模型，以及對離體實驗中原代星形膠質(zhì)細胞（ astrocyte， ast）的“糖氧剝奪/再灌注”(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation, OGD/Reoxygenation)模型，其載脂蛋白 E(apolipoprote

2、in E，apoE)、類視黃醇 X受體（Retinoic X receptor，RXR）和肝 X受體（Liver X receptor，LXR）的影響。
　　方法：在體實驗，采用“插線法”使 SD大鼠的大腦中動脈閉塞（Middle cerebral artery occlusion，MCAO）制作局灶性的I/R模型。將60只 SD（雄性）大鼠隨機地分為五個小組：假手術(shù)組(簡稱 SH)；模型組(簡稱IR)；姜黃素劑量組（100 mg

3、/kg、300 mg/kg）；尼莫地平陽性對照組（10 mg/kg）。再灌注24 h后，采用“盲評的方法”進行神經(jīng)功能缺損的評分估計；測定其腦含水量；用 Western印跡法檢測 apoE及LXR、RXR的表達；觀察各組，其腦組織形態(tài)學(xué)改變及運用原位細胞凋亡檢測法（簡稱：TUNEL法）來檢測每組大鼠海馬中的 CA1區(qū)域神經(jīng)元發(fā)生凋亡的情況。離體實驗則選取新出世SD大鼠，將其大腦皮層的星膠細胞進行原代培養(yǎng)，用“糖氧剝奪/再灌注”的方法來構(gòu)

4、建離體的腦缺血再灌注模型。運用免疫熒光的方法，來觀察神經(jīng)膠質(zhì)原纖維酸性蛋白（簡稱：GFAP）的表達，從而鑒定astrocyte。本實驗隨機地將培養(yǎng)的細胞分成七個小組：正常對照組；模型組；姜黃素劑量組：2.5 umol/L，5 umol/L，10 umol/L，20 umol/L；尼莫地平陽性對照組：0.5 umol/L。采用四甲基偶氮唑藍（MTT）和乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase，LDH)兩個指標分別對細胞的活力

5、以及其毒性進行評定。用蛋白質(zhì)印跡法（Western Blot）對星膠細胞 apoE、RXR、LXR的表達程度進行測定。
　　結(jié)果：在體實驗中，姜黃素（100 mg/kg、300 mg/kg）組可顯著改善MCAO大鼠的行為學(xué)體征；降低腦含水量；減輕腦組織形態(tài)學(xué)變化以及神經(jīng)元凋亡；上調(diào)apoE及LXR、RXR的表達。其中，姜黃素（300 mg/kg）組治療效果最是顯著。離體實驗中，姜黃素可使細胞活力明顯增高，LDH釋放量顯著降低，并使