隱匿性HBV感染者PBMC內HBVDNA檢測及HBVS區(qū)基因變異分析.pdf

1、背景：HBsAg 陽性是HBV 感染的重要證據。然而臨床上還存在大量HBsAg 陰性肝炎。有研究證實，在部份血清HBsAg 陰性的個體，應用聚合酶鏈反應（PCR）技術可以檢測出血清和（或）肝組織中HBVDNA，稱之為隱匿性HBV 感染。這種感染可發(fā)生于單個或者多個抗體陽性者，也可見于乙肝病毒血清學標志物（HBVM）均陰性的個體。隱匿性HBV 感染同樣可以通過輸血、器官移植、血液透析、母嬰垂直等途徑傳播，也會導致多種后果。例如：乙肝疫苗免

2、疫失敗、暴發(fā)性肝衰竭、慢性肝損害、與HCV 重疊感染加重病情、導致肝細胞癌的發(fā)生等。
　　 目的：1、探討不明原因肝病患者血清中與PBMC內HBVDNA的感染情況，判斷兩種檢測方式對隱匿性HBV 感染的診斷意義；
　　 2、研究隱匿性HBV 感染者HBV S 區(qū)基因變異情況，分析隱匿性HBV感染發(fā)生的分子生物學機制。
　　 方法：選擇不明原因肝病患者76例，分離患者血清及PBMC，分為血清組與PBMC組，采用巢式

3、PCR分別檢測兩組HBVDNA，陽性者結合臨床資料分析，血清組陽性者測序HBV S基因序列，分析變異位點。
　　 結果：（1）血清組和PBMC組HBVDNA 陽性率分別為21.05％(16/76)和9.21％（7/76），兩組比較，差異有統(tǒng)計學意義，血清組陽性率高于PBMC組。（2）1例患者血清HBVDNA 陰性，但PBMC內HBVDNA 陽性。（3）7例PBMC內HBVDNA 陽性者，臨床診斷均為肝硬化。結合臨床資料發(fā)現，PB

4、MC組陽性者肝硬化并發(fā)癥出現幾率高，病情重，合并癥多。（4）血清內HBVDNA 陽性者隨機抽取8例測序，a 決定簇內序列比對發(fā)現，nt574 出現A→T的突變，推導氨基酸無變化；nt587 出現G→A的突變，推導至氨基酸甘氨酸變異為精氨酸,即較為常見的G145R 突變。A 決定簇外基因序列比對發(fā)現，nt355，nt484 堿基均由A→C,推導氨基酸無變化，nt512堿基由C→A，推導氨基酸由脯氨酸變異為蘇氨酸。
　　 結論：1、