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文檔簡(jiǎn)介
1、以“紫羅蘭”紫薯為原料,研究提取純化紫薯花青素的方法,得到不同純度的紫薯花青素,研究其降壓和護(hù)肝作用。
用不同提取溶劑、微波功率、微波時(shí)間、pH值、料液比等進(jìn)行實(shí)驗(yàn),采用響應(yīng)面分析方法優(yōu)化紫薯花青素的微波輔助提取工藝條件。采用AB-8大孔樹脂對(duì)紫薯花青素進(jìn)行初步純化,然后采用中壓層析色譜進(jìn)一步純化。樣品中花青素的含量采用pH示差法檢測(cè)。通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)對(duì)所獲得的不同純度的花青素進(jìn)行降血壓和護(hù)肝功能評(píng)價(jià)。
提取結(jié)果表明,在
2、所選擇的提取溶劑中(蒸餾水、甲醇、乙醇、丙酮),酸乙醇(pH2.0,60%)的提取效果最好。微波輔助提取紫薯花青素的最佳工藝條件為乙醇體積分?jǐn)?shù)62%(pH2.0)、料液比1∶22.40(g/mL)、微波溫度52℃、微波時(shí)間4 min,在此條件下花青素的提取率為93.64%。
對(duì)粗提花青素用AB-8大孔樹脂進(jìn)行初步純化,結(jié)果顯示,1 gAB-8大孔樹脂吸附紫薯花青素飽和量為8.10 mg;選擇體積分?jǐn)?shù)為60%酸乙醇(pH1.0)
3、進(jìn)行解吸試驗(yàn),7.5倍柱體積的洗脫液基本可以達(dá)到完全洗脫。純化樣品花青素純度為9.48%。用中壓層析色譜法對(duì)AB-8大孔樹純化的樣品進(jìn)一步純化,純化樣品中花青素的純度為28.42%。
將不同純度的紫薯花青素灌胃12周齡雄性SHR大鼠和正常Wistar大鼠,研究不同純度的紫薯花青素降血壓作用。各個(gè)樣品灌胃劑量為:紫薯花青素Ⅰ(0.98%)的低、中、高灌胃劑量為102.04、510.20、1020.40 mg/kg bw;紫薯花青
4、素Ⅱ(9.48%)的低、中、高灌胃劑量為10.55、52.74、105.49 mg/kg bw;紫薯花青素Ⅲ(28.42%)的低、中、高灌胃劑量為3.52、17.59、35.19 mg/kg bw;紫薯色素Ⅳ(11.40%)的低、中、高灌胃劑量為8.77、43.86、87.72 mg/kg bw;灌胃SHR和Wistar大鼠,觀察對(duì)大鼠尾動(dòng)脈收縮壓(SBP)的影響。結(jié)果表明,隨著各種樣品灌胃劑量的增大,SHR血壓的降壓效果越來(lái)越好,紫薯
5、花青素Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的高劑量灌胃最低降壓值分別達(dá)到了22.81、24.90、26.24、22.52mmHg,與初始值相比較,降壓效果顯著(P<0.05)。相同劑量的花青素作用于Wistar大鼠,各劑量組與空白組相比較,紫薯花青素對(duì)Wistar大鼠的血壓沒(méi)有顯著影響(P>0.05)。后期對(duì)SHR連續(xù)灌胃實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),不同純度的紫薯花青素對(duì)降低血壓具有很好的穩(wěn)定性。通過(guò)對(duì)比發(fā)現(xiàn),在相同紫薯花青素含量下,紫薯花青素Ⅰ的降壓持續(xù)效果明顯優(yōu)于其他純度
6、的紫薯花青素。
將4周齡的ICR小鼠120只,隨機(jī)分為正常對(duì)照組、酒精性肝損傷模型組、陽(yáng)性對(duì)照藥組、樣品組,灌胃劑量分別為,陽(yáng)性對(duì)照(聯(lián)苯雙酯)組為150.00 mg/kg bw;紫薯花青素Ⅰ的低、中、高劑量組的灌胃劑量為170.07、340.14、1700.68 mg/kg bw;紫薯花青素Ⅱ的低、中、高劑量組的灌胃劑量為17.58、35.16、175.80mg/kg bw;紫薯花青素Ⅲ的低、中、高劑量組的灌胃劑量為5.86
7、、11.73、58.64 mg/kg bw;紫薯色素Ⅳ的低、中、高劑量組的灌胃劑量為14.62、29.24、146.20 mg/kg bw,連續(xù)灌胃30天。最后一天給各種劑量樣品1h后,酒精性肝損傷模型組和樣品組小鼠給予50%乙醇(12 mL/kg bw)灌胃,正常對(duì)照組小鼠給予同體積蒸餾水灌胃,禁食(自由飲水)。16h后處死小鼠,測(cè)定血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、甘油三酯(TG)含量和肝組織中還原型谷胱甘肽(GSH
8、)和丙二醛(MDA)含量,并觀察肝臟病理組織學(xué)變化。結(jié)果表明,紫薯花青素Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ組,紫薯花青素Ⅱ的高、中劑量組和陽(yáng)性對(duì)照組與酒精性肝損傷模型組相比較,小鼠血清AST、ALT和TG的含量顯著降低(P<0.01或P<0.05)。紫薯花青素Ⅰ組和Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的高、中劑量組,和陽(yáng)性對(duì)照組的小鼠肝臟GSH含量均比酒精性肝損傷模型組顯著升高,小鼠肝臟中MDA含量均比酒精性肝損傷模型組顯著降低(P<0.01或P<0.05)。肝臟病理組織學(xué)變化顯示紫薯
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