補(bǔ)陽(yáng)還五湯對(duì)肝硬化性心肌病大鼠心肌組織內(nèi)源性H2S水平的影響.pdf

1、目的：
　　實(shí)驗(yàn)一：觀察內(nèi)源性硫化氫（Hydrogen Sulfide, H2S）在不同時(shí)期肝硬化心肌?。–irrhotic Cardiomyopathy, CCM）大鼠心肌組織中的變化，探討其在CCM發(fā)病中的價(jià)值。
　　實(shí)驗(yàn)二：觀察不同劑量補(bǔ)陽(yáng)還五湯(Buyang Huanwudecoction, BHD)對(duì)肝硬化性心肌病大鼠心肌組織內(nèi)源性 H2S生成的影響，尋找治療肝硬化性心肌病的方法。
　　方法：
　　實(shí)驗(yàn)

2、一：40只SPF級(jí)雄性SD大鼠（Sprague Dawley, SD），體質(zhì)量約220-250g，隨機(jī)分為空白對(duì)照組（N組，n=9），余31只為模型組。N組給予標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料喂養(yǎng)，飲自來(lái)水。模型組大鼠給予60％CCl4橄欖油溶液皮下注射，以3ml/Kg，每周2次，首劑加倍，同時(shí)第l、2周以10%乙醇為唯一飲用水，第3、4周改20%乙醇為唯一飲用水，第5周開(kāi)始用30%乙醇為唯一飲用水。造模至12周時(shí)，取9只模型大鼠（模型組1，M1組）處死取

3、材。其余動(dòng)物繼續(xù)注射60%CCl4橄欖油溶液，飲用30％乙醇造模2周，實(shí)驗(yàn)結(jié)束模型大鼠為模型組2（M2組）。N組、M2組大鼠于14周末處死取材。常規(guī)檢測(cè)各組動(dòng)物肝功能（ALT、AST、TP）。檢測(cè)心肌組織H2S含量。檢測(cè)心肌及肝臟組織病理學(xué)。
　　實(shí)驗(yàn)二： SD雄性大鼠70只，體重約220-250g，按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)要求隨機(jī)分為空白對(duì)照組（Ⅰ組，n=10）、處理組（n=60）。處理組大鼠采用四氯化碳皮下注射聯(lián)合乙醇飲用法建立肝硬化性心

4、肌病大鼠模型。造模至12周末將模型組大鼠隨機(jī)分為4組：全部病例繼續(xù)給予四氯化碳皮下注射聯(lián)合乙醇飲用法造模，在此基礎(chǔ)上Ⅱ組（CCM模型組，予生理鹽水3ml·d-1灌胃）；Ⅲ組（BHD低劑量干預(yù)組，予補(bǔ)陽(yáng)還五湯14g·kg-1·d-1灌胃）；Ⅳ組（BHD中劑量干預(yù)組，予補(bǔ)陽(yáng)還五湯21g·kg-1·d-1灌胃）；Ⅴ組（BHD大劑量干預(yù)組，予補(bǔ)陽(yáng)還五湯28g·kg-1·d-1灌胃）。Ⅰ組每只大鼠予生理鹽水3ml·d-1灌胃，標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料喂養(yǎng)，自

5、由進(jìn)食、飲自來(lái)水。藥物干預(yù)周期為8周，實(shí)驗(yàn)周期共20周。檢測(cè)大鼠血清 cTnI水平、心肌組織H2S含量； HE染色觀察肝臟、心臟病理學(xué)。
　　結(jié)果:
　　實(shí)驗(yàn)一：⑴肝功能：M1組、M2組ALT、AST上升，TP下降，與N組比較有顯著差異（P<0.01）；M2組ALT、AST上升較M1組明顯，差異具有顯著性（P<0.05）。⑵心肌組織 H2S水平改變：與 N組比較，M1組心肌組織H2S下降達(dá)18%，差異具有顯著性（P<0.05

6、），M2組下降達(dá)38%，差異具有顯著性（P<0.01），M2組較M1組明顯，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。⑶肝臟病理學(xué)：N組為正常肝組織，M1組、M2組為肝硬化，M2組肝硬化程度較M1組嚴(yán)重。⑷心肌病理學(xué)：N組為正常心肌組織，細(xì)胞排列整齊；M1組心肌細(xì)胞大致正常，但出現(xiàn)心肌水腫；M2組除心肌水腫外，存在心肌細(xì)胞壞死。
　　實(shí)驗(yàn)二：⑴血清cTnI水平變化：與Ⅰ組比較，處理組(Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組)大鼠血清 cTnI明顯上升，

7、差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;與肝硬化性心肌病模型組Ⅱ組比較，藥物干預(yù)組（Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組）大鼠血清cTnI水平降低，且與劑量呈相關(guān)性，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；⑵心肌組織H2S水平變化：與Ⅰ組比較，處理組(Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組)大鼠心肌組織H2S水平下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；與Ⅱ組比較，Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組心肌組織 H2S水平升高，且Ⅴ組較Ⅲ組、Ⅳ組升高明顯，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；⑶肝臟組織

8、病理學(xué)：Ⅰ組大鼠肝組織無(wú)異常，Ⅱ組為重度肝硬化，Ⅴ組為輕度肝硬化，Ⅳ組為中度肝硬化，Ⅲ組肝硬化程度較Ⅳ組、Ⅴ組加重。⑷心肌組織病理學(xué)：Ⅰ組心肌組織正常；Ⅱ組（CCM模型組），部分心肌壞死、核消失，纖維化樣改變，橫紋消失，肌漿呈不規(guī)則粗顆粒狀，肌纖維呈條索狀，炎癥反應(yīng)明顯；Ⅲ（BHD低劑量干預(yù)組），心肌病理改變較Ⅱ組減輕；Ⅳ、Ⅴ組（分別為BHD中劑量組、BHD高劑量組），心肌細(xì)胞壞死減少，輕微纖維化伴炎癥反應(yīng)。
　　結(jié)論：