OCT2、DRD2和DRD3遺傳多態(tài)性對(duì)普拉克索藥代動(dòng)力和藥效學(xué)的影響.pdf

1、很多因素可以導(dǎo)致藥物反應(yīng)個(gè)體差異,例如年齡、性別、疾病狀態(tài)和遺傳等。遺傳藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)藥物代謝酶、受體和轉(zhuǎn)運(yùn)體的遺傳多態(tài)性是藥物反應(yīng)個(gè)體差異的決定因素。
　　 普拉克索是臨床用于治療帕金森病的多巴胺受體激動(dòng)劑。它為新型的非麥角堿類多巴胺受體激動(dòng)劑,對(duì)多巴胺D2類受體具有高度選擇性,對(duì)D2類受體的親和力依次為D3＞D2＞D4。目前對(duì)早期的帕金森病患者提倡首選多巴胺受體激動(dòng)劑治療,晚期可與左旋多巴合用,這樣可以盡量延緩左旋多巴開始治

2、療的時(shí)間和減少左旋多巴的劑量,以避免由于長(zhǎng)期使用左旋多巴導(dǎo)致的療效衰退以及引起癥狀波動(dòng)、運(yùn)動(dòng)障礙和精神癥狀等不良反應(yīng),而且普拉克索對(duì)多巴胺神經(jīng)有保護(hù)作用,可大大延緩病情的發(fā)展。普拉克索的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)為吸收迅速,約2小時(shí)達(dá)到血藥濃度高峰,生物利用度高于90％,食物對(duì)普拉克索的吸收影響很小,其在體內(nèi)分布廣泛,表觀分布容積約為500L,與血漿蛋白的結(jié)合率約為15％,半衰期在健康的年輕人平均為8小時(shí),在老年人大概為12小時(shí)。普拉克索的消除途徑

3、主要是通過腎臟,90％以原型從腎臟分泌排泄。研究表明普拉克索在腎臟的分泌主要由有機(jī)陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)體2(organic cation transporter2,OCT2)介導(dǎo)。但普拉克索在臨床實(shí)際應(yīng)用中存在顯著的個(gè)體差異。由于它不被酶代謝,所以有機(jī)陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)體2和它作用的靶受體DRD2和DRD3的遺傳多態(tài)性是導(dǎo)致它個(gè)體差異的重要因素。
　　 OCT2是腎臟表達(dá)最豐富的一種有機(jī)陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)體,其底物包括體內(nèi)多種生物活性物質(zhì)和多種藥物如:多

4、巴胺、二甲雙胍、金剛烷胺、西咪替丁等。近年來,OCT2基因上已陸續(xù)發(fā)現(xiàn)多個(gè)單核苷酸多態(tài)性(SNP),但很多SNP都存在顯著的種族差異性,例如Leabman的研究發(fā)現(xiàn)M165I和R400C兩種突變只出現(xiàn)在非裔美國(guó)人中,K432Q突變?cè)诜且崦绹?guó)人和墨西哥裔美國(guó)人存在,而A270S突變?cè)诓煌N族中都存在,并且頻率高達(dá)12.7％。進(jìn)一步功能研究顯示,M165I和R400C兩種突變顯著降低了蛋白的最大轉(zhuǎn)運(yùn)速率。R400C和K432Q突變顯示出對(duì)抑

5、制劑TBA的敏感性增強(qiáng),而突變頻率最高的A270S突變對(duì)抑制劑TBA的敏感性減弱。韓國(guó)研究者IS Song的研究發(fā)現(xiàn)A270S突變導(dǎo)致轉(zhuǎn)運(yùn)體最大轉(zhuǎn)運(yùn)速率Vmax與野生型相比顯著降低,在健康受試者的臨床實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),該突變影響二甲雙胍的藥代動(dòng)力學(xué)特征,突變后AUC和Cmax都顯著升高,CL/F顯著降低,并且呈現(xiàn)基因劑量效應(yīng)。
　　 多巴胺受體(DR)屬于G蛋白偶聯(lián)受體超家族。目前已知有五種DR(D1～D5),根據(jù)生化反應(yīng)和藥理生理特性

6、的不同,將五種DR分為D1類和D2類受體。D1類受體包括D1和D5,興奮時(shí)激活腺苷酸環(huán)化酶,使cAMP水平增加;D2類受體包括D2、D3和D4,興奮時(shí)抑制腺苷酸環(huán)化酶,使cAMP水平降低。圍繞DR和帕金森病的研究主要集中在D2和D3。多巴胺受體D2(DRD2)存在以下幾個(gè)突變:啟動(dòng)子區(qū)-141C Ins/Del突變;Taq1ARFLP;內(nèi)含子2中的(CA)n二核苷酸短串聯(lián)重復(fù)多態(tài)性;及三個(gè)錯(cuò)義突變:Ser311Cys,Pro310Ser

7、,Val96A1a。功能研究顯示,在Taq1A多態(tài)性位點(diǎn)攜帶A1等位基因的個(gè)體其紋狀體DRD2受體密度降低,并且影響與底物結(jié)合的特異性;DRD3基因位于3號(hào)染色體。目前已發(fā)現(xiàn)的突變有Ser9Gly和位于第5內(nèi)含子的MspI RFLP。Ser9Gly突變位于DRD3蛋白胞外的氨基端,對(duì)蛋白嵌入胞膜有影響,后又有研究表明9Gly突變?cè)鰪?qiáng)受體與多巴胺的親和力。
　　 基于以上研究背景,本課題旨在查明OCT2808G＞T突變?cè)诮】等撕团?/p>

8、金森患者的分布特征,該突變是否與帕金森病的遺傳易患性相關(guān);通過嚴(yán)謹(jǐn)?shù)呐R床實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)查明OCT2808G＞T突變?cè)诮】凳茉囌邔?duì)治療帕金森病藥物普拉克索藥代動(dòng)力學(xué)的影響;通過嚴(yán)謹(jǐn)?shù)呐R床實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),研究DRD2和DRD3常見遺傳突變對(duì)普拉克索在帕金森病人藥效的影響。
　　 本課題的主要研究結(jié)果如下:
　　 1.在漢族健康志愿者,OCT2808G＞T突變的T等位基因頻率為11.4％;在原發(fā)性帕金森病患者,突變的T等位基因頻率為3.1

9、％,顯著低于健康人群。表明OCT2808G＞T突變與帕金森病的遺傳易患相關(guān),該突變對(duì)帕金森病來說可能是一遺傳保護(hù)因子。
　　 2.建立簡(jiǎn)單、靈敏的LC-MS/MS方法檢測(cè)體內(nèi)鹽酸普拉克索血藥濃度。
　　 3.OCT2808G＞T基因多態(tài)性影響普拉克索的藥代特點(diǎn)。攜帶突變等位基因的受試者組普拉克索的Cmax和AUC顯著高于野生型純和子組,口服清除率則顯著低于野生型純和子組。
　　 4.在中國(guó)的帕金森患者中,DRD3

10、 Ser9Gly多態(tài)性和普拉克索的療效顯著相關(guān),突變后有效率顯著降低,DRD2 Taq1A多態(tài)性與普拉克索的療效無顯著相關(guān)。但需要更大范圍和多劑量的臨床試驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證多巴胺受體遺傳多態(tài)性對(duì)普拉克索療效的影響。
　　 總之,本項(xiàng)目從分子水平、健康受試者和臨床病人水平對(duì)普拉克索的藥物反應(yīng)個(gè)體差異提供了遺傳藥理水平的解釋,為臨床合理應(yīng)用普拉克索提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論指導(dǎo),服用普拉克索的帕金森患者先行進(jìn)行OCT2、DRD2和DRD3基因型