遲鈍愛德華菌對大鯢的感染和死疫苗初次免疫保護(hù)作用.pdf

1、目的:研究遲鈍愛德華菌對大鯢的致病作用;制備死疫苗并探討其保護(hù)作用,為大鯢的遲鈍愛德華菌病防治奠定基礎(chǔ)。
　　 方法:制備甲醛滅活的遲鈍愛德華菌死疫苗,經(jīng)小鼠做毒性試驗(yàn)無不良反應(yīng)。將15尾體重25g至300g的健康大鯢隨機(jī)分為對照組、感染組、免疫組(107個(gè)/ml、108個(gè)/ml、109個(gè)/ml),每組3尾。對照組和感染組第1周肌注O.1ml生理鹽水。免疫組第1周肌注0.1ml濃度分別為107個(gè)/ml、108個(gè)/ml、109個(gè)/

2、ml死疫苗。第7周,對照組肌注0.1ml生理鹽水外,感染組和免疫組肌注0.1ml107cfu/ml遲鈍愛德華活菌。48小時(shí),取組織冰凍切片,以兔抗遲鈍愛德華菌血清為一抗免疫熒光法檢測感染后組織器官中細(xì)菌分布。采用TUNEL法檢測各組大鯢肝、脾組織細(xì)胞凋亡。
　　 結(jié)果:與對照組比較活菌攻擊后感染組、免疫組大鯢均出現(xiàn)活動(dòng)減少、離群獨(dú)居現(xiàn)象,免疫組恢復(fù)較快。攻擊后48小時(shí)組織免疫熒光技術(shù)發(fā)現(xiàn),感染組,免疫肝、脾組織可出現(xiàn)顆粒狀、塊狀

3、熒光物質(zhì),免疫組中可見熒光較感染組少。進(jìn)行凋亡率測定的肝、脾組織,感染組均較對照組高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);各免疫組與對照組比較、各免疫組與感染組比較、各免疫組間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 結(jié)論:1.肌注0.1ml107cfu/ml遲鈍愛德華活菌能引起大鯢的感染,出現(xiàn)活動(dòng)減少、離群獨(dú)居現(xiàn)象,且能在肝、脾組織中檢測到細(xì)菌。2.細(xì)胞凋亡可能是大鯢遲鈍愛德華菌感染的致病機(jī)理之一。3.死疫苗初次免疫效果