遲緩愛德華氏菌特異性卵黃抗體對大菱鲆的被動保護研究.pdf

1、大菱鲆（Scophthalmus maximus）是世界范圍內(nèi)公認的優(yōu)良經(jīng)濟魚種之一，近年來其集約化養(yǎng)殖導致病害頻發(fā)，經(jīng)濟損失嚴重，其中遲緩愛德華氏菌是威脅大菱鲆養(yǎng)殖業(yè)的首要病原菌。常見抗生素防治已導致菌株產(chǎn)生耐藥性，且藥物殘留問題威脅食品安全和人類健康。卵黃抗體因具有特異性高、無耐藥性、符合動物權(quán)益保護等優(yōu)點，被視為一種重要的綠色安全抗生素替代品，其作為控制水生動物細菌性傳染疾病的有效手段也越來越受到人們關(guān)注。
　　本研究以分離

2、自患病大菱鲆的遲緩愛德華氏菌(Edwardsiella tarda)制備滅活菌苗，免疫蛋雞，經(jīng)水稀釋-凍融-二次鹽析-超濾濃縮-冷凍干燥后獲得卵黃抗體(IgY)提純粉，測定其純度為83.9％，ELISA測定抗體效價高達1∶25000;間接ELISA法檢測特異性IgY對同種其他遲緩愛德華氏菌分離株同樣具有高效結(jié)合活性。
　　特異性IgY對遲緩愛德華氏菌的體外抑菌結(jié)果顯示，10 mg/mL特異性IgY能顯著抑制遲緩愛德華氏菌在液體培養(yǎng)

3、基中的生長;免疫熒光及透射電鏡顯示，特異性IgY能夠與病原菌表面有效結(jié)合，使菌體凝集;掃描電鏡進一步觀察到IgY處理組遲緩愛德華氏菌菌體發(fā)生形變，菌體表面黏連且粗糙不平。特異性IgY能夠顯著降低對菌體表面疏水性及生物被膜形成能力(P＜0.05)，影響菌體的黏附力;菌體與IgY的反應(yīng)液中堿性磷酸酶含量顯著增高(P＜0.05)，推測其細胞壁完整性遭到破壞。
　　動物試驗表明，大菱鲆經(jīng)口服灌胃不同劑量特異性卵黃抗體后，死亡率均有降低，其

4、中200 mg/kg（卵黃抗體量/魚體重）劑量組治療效果最佳，死亡率僅為12.5％，與對照組相比降低了69％;同時大菱鲆主要器官載菌量實驗也顯示，特異性IgY處理組大菱鲆肝臟、脾臟、頭腎、腸道內(nèi)的細菌數(shù)量與對照組相比顯著降低。將卵黃抗體提純粉及卵黃粉分別添加入飼料中，均對攻毒大菱鲆起到不同程度的保護作用，2％特異性IgY組存活率為75％，10％特異性卵黃粉試驗組大菱鲆存活率為62.5％。
　　IgY對大菱鲆非特異性免疫相關(guān)免疫細胞