黃芩苷促進體外培養(yǎng)小鼠胚胎發(fā)育及其機制的研究.pdf

1、黃芩苷(baicalin)是從黃芩根部分離出來的主要活性成分之一，安胎作用顯著。本試驗以小鼠胚胎為研究對象，在 CZB培養(yǎng)基中添加不同濃度黃芩苷，以探討黃芩苷是否可以提高體外培養(yǎng)小鼠胚胎卵裂率、囊胚發(fā)育率、囊胚細胞數和囊胚質量，并通過胚胎發(fā)育重要基因的表達量變化來評價囊胚質量，揭示黃芩苷促進體外培養(yǎng)小鼠胚胎發(fā)育的機制。
　　實驗選用體內和體外培養(yǎng)的小鼠胚胎，分別設對照組以及在培養(yǎng)基中添加黃芩苷（2、4和8μg/mL）實驗組，觀察并

2、記錄2-和4-細胞卵裂率，桑葚胚和囊胚發(fā)育率，囊胚細胞數。用實時熒光定量PCR（qRT-PCR）檢測各組胚胎發(fā)育相關基因GJA1和CDH1，應激相關基因HSP70，凋亡相關基因BAX和BCL-2，DNA甲基轉移酶基因DNMT1和DNMT3a表達。結果發(fā)現，與體內對照組比，體外培養(yǎng)胚胎各階段發(fā)育率極顯著降低(P<0.01)，添加黃芩苷后，與體外對照組比，2和4μg/mL黃芩苷顯著提高胚胎各階段的發(fā)育率(P<0.05)，其中，4μg/mL黃

3、芩苷組囊胚發(fā)育率（78.6±4.08％）極顯著(P<0.01)高于2μg/mL黃芩苷組（63.8±2.56%）和體外對照組（53.7±3.45%），低于(P<0.01)體內對照組（90.3±5.07%）。而且，與體外對照組和其他黃芩苷組比，4μg/mL黃芩苷顯著提高囊胚細胞數(P<0.05)，并接近體內組囊胚細胞數。與體內對照組比，體外培養(yǎng)囊胚中GJA1，CDH1和BCL-2基因表達量下降，而HSP70，BAX和DNMT1基因表達量升高