桑黃生物學(xué)特性及子實(shí)體分化發(fā)育條件研究.pdf

1、桑黃是目前發(fā)現(xiàn)的生物抗癌領(lǐng)域功效較顯著的一種藥用真菌，其有效成分一般是從子實(shí)體中提取得到的子實(shí)體多糖。由于野生桑黃子實(shí)體被過(guò)度采摘，使野生資源瀕臨枯竭，加上其人工栽培技術(shù)尚不成熟等，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿(mǎn)足醫(yī)藥市場(chǎng)對(duì)其的需求。目前雖有人工培育出的子實(shí)體，但因技術(shù)不成熟，子實(shí)體的產(chǎn)量低，質(zhì)量差，并且尚未能進(jìn)行產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。
　　 本文以開(kāi)發(fā)利用桑黃這一新興的藥用菌資源，探明其子實(shí)體分化發(fā)育條件為目的，首先對(duì)8個(gè)不同來(lái)源桑黃菌株(R、H、S6、S

2、7、S8、S、W、S1)菌絲體的生物學(xué)特性及生長(zhǎng)條件進(jìn)行了研究，在此基礎(chǔ)上對(duì)菌株R子實(shí)體的分化和發(fā)育生長(zhǎng)進(jìn)行探索研究，主要得出以下研究結(jié)果。
　　 通過(guò)對(duì)桑黃菌絲體生物學(xué)及培養(yǎng)條件的研究得出，桑黃斜面菌絲體生長(zhǎng)較佳的培養(yǎng)基配方為：馬鈴薯200g，葡萄糖20g，硫酸鎂0.5g，瓊脂15～20g，維生素B110mg，加水定容至1000mL，pH值自然；較佳的生長(zhǎng)條件為：溫度27℃～28℃，暗室培養(yǎng)。
　　 對(duì)菌絲體的普通染色

3、顯微觀察結(jié)果顯示，菌絲在生長(zhǎng)到一定時(shí)期出現(xiàn)了橫隔和鎖狀聯(lián)合等特征結(jié)構(gòu)，桑黃菌絲為管狀，有分支。對(duì)H和S兩個(gè)菌株彈射出的孢子顯微觀察結(jié)果顯示，兩個(gè)菌株孢子形態(tài)相似，均為卵圓形或橢圓形，有同心環(huán)，表面光滑，一端有一個(gè)小凸起，為萌發(fā)孔。
　　 吖啶橙對(duì)桑黃菌絲進(jìn)行熒光染色時(shí)，染色條件以pH5.8～6.0，染色時(shí)間以4min為宜。由熒光染色結(jié)果可以清晰的看到管狀菌絲內(nèi)由綠色至橙紅色、紅色等不同顏色分布，頂端和橫隔處熒光較亮，說(shuō)明此處DN

4、A和RNA含量較高，這應(yīng)該與這兩處生長(zhǎng)、分裂較為旺盛有關(guān)系。
　　 對(duì)桑黃固體培養(yǎng)菌絲體基質(zhì)中的羧甲基纖維素酶、漆酶、多酚氧化酶、愈創(chuàng)木酚酶、過(guò)氧化物酶等胞外酶的活性進(jìn)行了測(cè)定，結(jié)果顯示在同一生長(zhǎng)時(shí)期，每種酶酶活性不同，且同一種酶隨生長(zhǎng)時(shí)期的變化，酶活性也發(fā)生變化，表明了桑黃菌絲體對(duì)纖維素及木質(zhì)素兩種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用情況存在差異。
　　 采用DNS法測(cè)定還原糖含量，選用苯酚-硫酸法測(cè)定總糖含量。在整個(gè)固體培養(yǎng)過(guò)程中，總糖含

5、量變化不是很大；還原糖含量變化出現(xiàn)兩個(gè)高峰期，分別在第17d和第25d。
　　 通過(guò)對(duì)桑黃固體培養(yǎng)過(guò)程的研究，得出桑黃固體菌絲體生長(zhǎng)較佳的培養(yǎng)基配方為：棉籽殼78％，麩皮20％，石膏1.5％，硫酸鎂0.2％，磷酸二氫鉀0.3％，料水比1：1.5；較佳的生長(zhǎng)條件為溫度27℃～28℃，喑室培養(yǎng)。桑黃菌株(R)子實(shí)體較佳的分化及生長(zhǎng)條件為晝夜溫差培養(yǎng)，空氣相對(duì)濕度90％～95％，及時(shí)通風(fēng)換氣，每天早晚各通風(fēng)一次，每次通風(fēng)20min，自