類泛素化修飾蛋白家族成員在人腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)研究.pdf

1、目的：檢測SUMO通路核心成員SUMO-1、SUMO-2/3、SENP1、SENP2及UBC-9在神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤組織及細(xì)胞株中的定位及定量的表達(dá)情況，并分析其表達(dá)水平與腫瘤分級(jí)的關(guān)聯(lián)及未來治療方向。
　　方法：本實(shí)驗(yàn)以西安奧美生物科技有限公司的病理組織芯片100例及天津市第五中心醫(yī)院2009年~2014年收集的腦膠質(zhì)瘤組織（WHO組織病理分級(jí)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級(jí)）各12例及8例正常腦組織為研究對象，利用免疫組化檢測SUMO通路核心成員SUM

2、O-1、SUMO-2/3、SENP1、SENP2、UBC9在腦膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)，Westernblot方法檢測SUMO-1、SUMO-2/3、UBC9在腦膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)量；體外培養(yǎng)人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤U87、U251及鼠源性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤F98細(xì)胞株，細(xì)胞免疫熒光方法檢測SUMO-1、SUMO-2/3在上述三個(gè)細(xì)胞株及原代培養(yǎng)的膠質(zhì)細(xì)胞中的表達(dá)定位，Westernblot方法檢測其在細(xì)胞株中的表達(dá)量。
　　結(jié)果：基于組織芯片的免疫

3、組化結(jié)果顯示：SUMO1在星形細(xì)胞瘤2級(jí)中的陽性表達(dá)率為4/30（13.33％）、在星形細(xì)胞瘤3級(jí)中的陽性表達(dá)率為14/30（46.67%）、在星形細(xì)胞瘤4級(jí)中的陽性表達(dá)率為26/30（86.67%），主要定位于細(xì)胞漿及細(xì)胞核中。SUMO2/3在星形細(xì)胞瘤2級(jí)中的陽性表達(dá)率為5/30（16.67%）、在星形細(xì)胞瘤3級(jí)中的陽性表達(dá)率為12/30（40.00%）、在星形細(xì)胞瘤4級(jí)中的陽性表達(dá)率為24/30（80.00%），主要定位于細(xì)胞漿及

4、細(xì)胞核中。SENP1在星形細(xì)胞瘤2級(jí)中的陽性表達(dá)率為4/30（13.33%）、在星形細(xì)胞瘤3級(jí)中的陽性表達(dá)率為13/30（43.33%）、在星形細(xì)胞瘤4級(jí)中的陽性表達(dá)率為25/30（83.33%），主要定位于細(xì)胞漿及細(xì)胞核中。SENP2在星形細(xì)胞瘤2級(jí)中的陽性表達(dá)率為4/30（13.33%）、在星形細(xì)胞瘤3級(jí)中的陽性表達(dá)率為14/30（46.67%）、在星形細(xì)胞瘤4級(jí)中的陽性表達(dá)率為27/30（86.67%），主要定位于細(xì)胞漿及細(xì)胞核中

5、。UBC9在星形細(xì)胞瘤2級(jí)中的陽性表達(dá)率為5/30（16.67%）、在星形細(xì)胞瘤3級(jí)中的陽性表達(dá)率為16/30（53.33%）、在星形細(xì)胞瘤4級(jí)中的陽性表達(dá)率為26/30（86.67%），主要定位于細(xì)胞漿及細(xì)胞核中。基于收集的腦膠質(zhì)瘤組織的Westernblot結(jié)果顯示：游離及共價(jià)結(jié)合的SUMO1及SUMO2/3、UBC9隨著膠質(zhì)瘤惡性增高表達(dá)量呈明顯增高趨勢（F=15.437，P＜0.05）。基于膠質(zhì)瘤細(xì)胞株的細(xì)胞免疫熒光結(jié)果顯示：S

6、UMO1及SUMO2/3主要定位于細(xì)胞漿，但在正常膠質(zhì)細(xì)胞中幾乎未見表達(dá)。基于膠質(zhì)瘤細(xì)胞株的Wseternblot結(jié)果顯示：SUMO1及SUMO2/3在惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞株U87、U251及鼠源性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤F98中均有較高水平表達(dá)，明顯高于正常膠質(zhì)細(xì)胞（F=14.684，P＜0.05）。
　　結(jié)論：SUMO通路核心成員SUMO-1、SUMO-2/3、SENP-1、SENP-2、UBC-9在膠質(zhì)瘤組織及膠質(zhì)瘤細(xì)胞株中均有較高程度的表達(dá)