OX40-OX40L在SLE患者外周血淋巴細(xì)胞上的表達(dá)特性及其生物學(xué)意義.pdf

1、目的：通過研究OX40和OX40L分子在系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者外周血淋巴細(xì)胞上的表達(dá)及其在SLE發(fā)病機(jī)制中的可能作用，調(diào)控OX40、OX40L在相應(yīng)靶細(xì)胞上的表達(dá)和阻斷OX40/OX40L通路從而減少炎癥反應(yīng)的發(fā)生，為治療自身免疫疾病提供新的思路。
　　 方法：采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)技術(shù)對(duì)43例SLE患者和15例健康志愿者外周血淋巴細(xì)胞上OX40和OX40L的表達(dá)水平進(jìn)行分析，同時(shí)，對(duì)SLE患者中的腎炎型與非腎炎型外周血淋巴細(xì)

2、胞上OX40和OX40L的表達(dá)水平進(jìn)行比較，并對(duì)10例SLE患者進(jìn)行治療前后OX40和OX40L表達(dá)水平的比較。測(cè)定OX40和OX40L表達(dá)水平的具體步驟為：(1)每個(gè)流式管加入50ul外周血，分別加入CD4-Tc、OX40-FITC和OX40L-PE，4℃度反應(yīng)時(shí)間20min；(2)同時(shí)設(shè)陰性對(duì)照管，對(duì)照管中加入CD4-Tc、IgG-FITC和IgG-PE或CD19-FITC、IgG-PE，4度反應(yīng)20min；(3)加入溶血?jiǎng)┝呀饧t細(xì)

3、胞直至液體變清；(4)再加磷酸鹽緩沖液(PBS)洗滌；(5)離心1800rpm，5min；(6)離心后，倒掉上清，加0.5ml PBS上流式細(xì)胞儀測(cè)表型。
　　 結(jié)果：OX40和OX40L在CD4+T細(xì)胞上共表達(dá)。與正常對(duì)照組相比：(1)SLE患者外周血中，CD4+TOX40+OX40L+細(xì)胞亞群數(shù)量增加；(2)CD8+TOX40+OX40L+細(xì)胞亞群數(shù)量無變化；(3)OX40L+B細(xì)胞增加；(4)OX40L+單核細(xì)胞增加；(5

4、)OX40L在NK細(xì)胞上表達(dá)增強(qiáng)。在SLE患者中，腎炎型患者CD4+OX40+T細(xì)胞增加且明顯大于非腎炎型；此外，發(fā)現(xiàn)SLE患者治療后OX40和OX40L表達(dá)均有不同程度下調(diào)。
　　 結(jié)論：SLE患者外周血T淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、NK細(xì)胞上存在OX40和OX40L的異常表達(dá)，在腎炎型患者表達(dá)上調(diào)，治療前后表達(dá)水平有顯著變化。提示OX40/OX40L信號(hào)在T細(xì)胞與單核細(xì)胞、NK細(xì)胞的相互作用過程中可能有助于T細(xì)胞的持續(xù)活化，從而參與