急性冠脈綜合征表達OX40-OX40配體的臨床研究.pdf

1、冠心病是最常見的心血管疾病，動脈粥樣硬化(AS)是其病理基礎。急性冠脈綜合征(ACS)是由于冠狀動脈不穩(wěn)定動脈粥樣硬化(AS)斑塊破裂繼發(fā)血栓形成，導致管腔嚴重狹窄或閉塞引起急性或亞急性心肌缺血的臨床綜合征；包括不穩(wěn)定型心絞痛(UA)、ST段抬高的心肌梗死(STEMI)和非ST段抬高心肌梗死(NSTEMI)。眾多資料顯示：ACS患病率逐年增高，目前已成為心血管疾病的“頭號無聲殺手”。ACS發(fā)生的病理基礎為AS易損斑塊的存在。AS的發(fā)生機

2、制是多因素綜合作用所誘發(fā)的機體應答反應。眾多研究表明，炎癥反應及免疫介導在AS的發(fā)生及斑塊的破裂中起重要作用。大量研究證實，穩(wěn)定型心絞痛(SAP)患者體內存在的多是穩(wěn)定斑塊，局部炎癥反應輕，而ACS患者冠脈內斑塊為不穩(wěn)定性斑塊，斑塊的纖維帽邊緣有大量炎癥細胞及細胞因子聚集，特別是激活的CD4+ T淋巴細胞，能積極參與AS斑塊的免疫與炎癥反應。因此，T淋巴細胞的激活是AS重要的炎性致病因素。 OX40/OX40配體(OX40U)

3、是一對互補的跨膜糖蛋白，分別屬于腫瘤壞死因子(TNF)超家族和TNF家族的成員，是免疫應答中一對協同刺激分子。OX40定位于活化的CD4+和CD8C+T細胞。OX40+T細胞是抗原特異性T細胞，只表達于活化的T細胞表面，集中于淋巴組織的T細胞區(qū)和外周炎癥部位。OX40L表達在多種細胞表面，包括樹突狀細胞(DC)、B細胞、血管內皮細胞、巨噬細胞以及某些組織細胞，OX40L還能以可溶性的形式存在于血漿中。OX40與其配體OX40L結合后，通

4、過抑制炎癥細胞凋亡，促進活化后T淋巴細胞的存活和增殖，介導炎癥反應，影響了AS斑塊形成的進程。OX40L基因已成為目前動物實驗證據最充分的動脈粥樣硬化的易感基因。研究證實：OX40L基因單核苷酸多態(tài)性(SNP)與急性心肌梗死的易感性相關。但OX40和OX40L在ACS體內表達水平與其發(fā)生、發(fā)展及臨床頇后目前仍不清楚。 本實驗中，我們用間接免疫熒光流式細胞術檢測ACS組、SAP組及對照組的外周血淋巴細胞表達OX40、OX40L水平

5、，用酶聯免疫吸附法(EUSA)檢測各組血清可溶性OX40L(sOX40L)水平，并檢測急性心梗(AMI)患者血清sOX40L水平的動態(tài)變化。所有入選者均經冠脈造影，并對冠狀動脈斑塊形態(tài)進行評估，將冠脈病變分為復雜狹窄(復雜狹窄的特征為：①形態(tài)不規(guī)則或邊緣有扇形皺褶。②病變邊緣斷裂，凸出與血管壁成角。③表面有潰瘍形成。④有充盈缺損等冠脈內血栓征象。)與光滑狹窄(無上述表現的冠脈狹窄為光滑狹窄)。分析ACS組血清sOX40L水平與冠脈復雜狹

6、窄的相關性。結果顯示：(1)ACS組外周血淋巴細胞表達OX40[AMI組：(7.40±1.56)％，UA組：(6.70±1.49)％]和OX40L[AMI組：(5.72±1.30)％，UA組：(5.50±1.13)％]明顯較SAP組[(2.54±0.56)％；(2.04±0.56)％]和對照組[(2.41±0.49)％；(1.94±0.58)％]高(P＜0.01)，SAP與對照組相比均無差異(P=0.064)。(2)ACS組血清sOX4

7、0L[AMI組：(9.43±2.34)ng/ml，UA組：(9.04±1.95)ng/ml]水平明顯較SA[(3.13±1.29)ng/ml]和對照組[(2.98±1.28)ng/ml]高(P＜0.01)，而SAP與對照組相比亦無明顯差異(P=0.47)。(3)AMI患者在發(fā)病后72小時內血清sOX40L維持在較高水平，之后開始漸降，一周左右降至SAP組水平。(4)ACS組血清sOX40L水平與冠脈病變復雜狹窄數呈顯著正相關(r=0.5

8、8，P＜0.001)。 為了進一步說明OX40—OX40L在ACS發(fā)病機制中與不穩(wěn)定斑塊之間的關系，本研究中，我們采用ELISA法分別檢測各組血清基質會屬蛋白酶-9(MMP-9)水平和血清C—反應蛋白(CRP)。并分析血清MMP-9、CRP與血清sOX40L水平的相關性。結果顯示：(1)ACS組血清MMP-9水平[AMI組：(61.35±22.97)ng/ml，UA組：(59.66±19.70)ng/ml]明顯較SAP組[(30

9、.51±12.72)ng/ml]和對照組[(29.78±11.94)ng/ml)]高(P＜0.01)，而SAP與對照組相比亦無明顯差異(P=0.70)，而且血清sOX40L水平與MMP-9呈顯著正相關(r=0.70，P＜0.001)。(2)ACS組血清CRP水平[(AMI組：(4.99±1.20)mg/L，UA組：(4.72±1.32)mg/L]明顯較SAP組[(1.41±0.40)mg/L]和對照組[(1.37±0.36)mg/L]高

10、(P＜0.01)，而SAP與對照組相比亦無明顯差異(P=0.41)，而且血清sOX40L水平與CRP呈顯著正相關(r=0.84，P＜0.001)。 總之，本實驗研究表明，人的外周血淋巴細胞存在少量的OX40和OX40L的基礎表達，血清中sOX40L也處于較低的基礎水平，ACS患者外周血淋巴細胞表達OX40和OX40L的水平及血清sOX40L水平均明顯升高，而且血清sOX40L水平與冠脈復雜狹窄及血清MMP-9、CRP的水平呈顯著