奧伐尼和胡椒堿對成熟鼠脊髓膠狀質(zhì)神經(jīng)元自發(fā)興奮性突觸傳遞的研究.pdf

1、目的：短瞬受體電位(TRP)通道，TRPV1和TRPA1通道在感覺傳導(dǎo)纖維介導(dǎo)的外周至中樞神經(jīng)系統(tǒng)的疼痛信號傳遞中起了重要作用。辣椒素類鎮(zhèn)痛藥，如奧伐尼和胡椒堿通過激活背根神經(jīng)節(jié)(DRG)神經(jīng)元胞體上的TRPV1通道并增加TRPV1通道的表達(dá)起到鎮(zhèn)痛作用。同為辣椒素類鎮(zhèn)痛藥的RTX不僅可激活DRG神經(jīng)元胞體的TRPV1通道，而且還可通過激活DRG神經(jīng)元中樞末梢的脊髓膠狀質(zhì)(substantia gelatinosa，SG，laminaⅡ

2、of Rexed)神經(jīng)元上的TRPV1通道達(dá)到鎮(zhèn)痛效果。脊髓膠狀質(zhì)層作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)軀體感覺傳導(dǎo)通路(sensorypathway)中痛覺信息傳入的初級門戶，接受軀體性外周痛覺信號中初級傳入纖維的投射，在疼痛信號的傳導(dǎo)中有著重要的意義。所以，本實(shí)驗(yàn)主要為了解辣椒素類鎮(zhèn)痛藥奧伐尼和胡椒堿是否也可通過激活脊髓SG神經(jīng)元TRP通道，起到鎮(zhèn)痛作用。
　　 方法：成熟雄性SD鼠(6-8周)經(jīng)烏拉坦腹腔注射麻醉(1.2-1.5g/kg)后，

3、行腰骶部椎板切除術(shù)。取出腰骶部脊髓(L1-S3)，振動切片，片厚600-800微米(μm)。不同溶度奧伐尼、胡椒堿及TRPA1通道抑制劑HC-030031和TRPV1通道抑制劑抗辣椒素的溶液灌注記錄槽，盲法全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)記錄SG神經(jīng)元的自發(fā)興奮性突觸后電流(sEPSC)。
　　 結(jié)果：固定電位保持在-70mV時(shí)，0.1-40μM奧伐尼灌注5分鐘，自發(fā)興奮突觸后電流(sEPSC)的頻率和波幅無顯著性變化(P>0.05)。另一方面

4、，胡椒堿灌注2分鐘sEPSC的頻率呈劑量-依賴關(guān)系增加，EC50為52.31μM(Hill系數(shù)為4.54)，伴隨波幅小幅度增加。胡椒堿增加sEPSC頻率的效果是可逆的，20分鐘和1小時(shí)以后重復(fù)用藥作用可被同化。而胡椒堿的這一特性可被TRPV1通道抑制劑抗辣椒素(10μM)或TRPA1通道抑制劑HC-030031(50μM)阻斷。
　　 結(jié)論：胡椒堿能激活DRG神經(jīng)元中樞終端的TRPV1和TRPA1通道，導(dǎo)致釋放至SG神經(jīng)元的自發(fā)