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文檔簡介
1、目的:以香芹酚為主要成分的牛至精油具有許多藥理作用,其中包括抗痙攣和鎮(zhèn)痛作用。雖然已有研究表明口服香芹酚具有鎮(zhèn)痛的效果,但是這種作用的細胞機制尚不明確。為了明確其中機制,我們利用全細胞膜片鉗技術(shù)檢測香芹酚對成年雄性大鼠脊髓膠狀質(zhì)(substantia gelatinosa,SG; laminaⅡ of Rexed神經(jīng))細胞的谷氨酸能自發(fā)性興奮性傳遞的影響。
方法:用烏拉坦向成熟雄性SD大鼠(6-7周)施以全身麻醉(1.2 g/
2、kg,腹腔注射),隨后行腰骶部椎板切除術(shù)。取出腰骶部的脊髓(L1-S3),利用振動微切片機切取600-800微米(μm)厚度的脊髓切片,放置于標本記錄槽內(nèi)的尼龍網(wǎng)托上。然后利用盲法全細胞膜片鉗技術(shù)記錄SG神經(jīng)元的生物電信號。用含有香芹酚或其他藥物成分的溶液灌注記錄槽。
結(jié)果:保持維持電位在-70 mV時,對SG神經(jīng)元灌注香芹酚(1 mM/L)兩分鐘時后,可誘導(dǎo)產(chǎn)生外向電流或增加SG細胞自發(fā)性興奮性突觸后電位(sEPSC)的頻率
3、或者同時誘導(dǎo)產(chǎn)生外向電流和增加sEPSC頻率。另一方面,灌流香芹酚兩分鐘呈劑量-依賴關(guān)系增加sEPSC的頻率和外向電流幅度,EC50分別為0.69 mM和0.55 mM。香芹酚增加sEPSC頻率和產(chǎn)生外向電流的效果是可逆的。香芹酚增加sEPSC頻率的能力能被TRPA1通道拮抗劑HC-030031抑制但不能被TRPV1通道的拮抗劑抗辣椒素抑制,結(jié)果顯示抗辣椒素不能影響香芹酚增加sEPSC頻率的能力。外向電流的電流-電壓關(guān)系曲線表明此過程中
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