芹菜素對大鼠心肌缺血再灌注細胞凋亡的保護作用.pdf

1、目的：探討黃酮類化合物芹菜素對大鼠實驗性心肌缺血再灌注(ischemia/reperfusion, I/R)時心肌細胞凋亡與Bcl-2、Bax和Caspase-3表達的影響，并分析其對心肌損傷的保護作用。
　　 方法：采用結扎左冠狀動脈前降支，心肌缺血45 min，再灌注2 h制作缺血再灌注模型。將大鼠隨機分為八組，即正常組（the normAlgroup, Normal）、假手術組（sham operation group,

2、Sham）、生理鹽水缺血再灌注組(physiologicAlsaline ischemia-reperfusion group, NS)、溶劑對照組(solvent control group, Sol)、美托洛爾對照組（metoprolol control group, Meto）、芹菜素低、中、高劑量（1mg·kg-1、2 mg·kg-1、4 mg·kg-1）用藥組(apigenin low, medium and high dos

3、e treatment group, Api1、Api2、Api4)。同時觀察大鼠再灌注心律失常持續(xù)時間和再灌注心律失常評分。再灌注2 h后，采用化學法測定一氧化氮(nitric oxide，NO)含量，用721分光光度計測定一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)活力；用1％Evean Blue和2,3,5-三苯基氯化四氮(2,3,5-tri phenyltetrazolium chloride, TTC)

4、染色法測定心肌損傷面積和梗死面積；采用TUNEL法檢測原位標記凋亡心肌細胞；免疫組化法測Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表達；病理組織切片檢查心肌損傷情況;采用RT-PCR法測Bcl-2和Bax基因的mRNA表達。
　　 結果：⑴芹菜素各劑量組血清樣品中NO含量均顯著高于NS組（P<0.05），其中，Api4組的NO含量最高。⑵芹菜素各劑量組的心肌組織樣品中總NOS活力和cNOS活力顯著高于NS組（P＜0.05），其中

5、Api4組的總NOS活力和cNOS活力最高。iNOS活力在各組之間沒有差異，且iNOS活力比cNOS活力低的多。⑶芹菜素各劑量組與NS組比較，劑量依賴性地縮小大鼠缺血再灌注心肌梗死面積(P＜0.05)。⑷ Api4組和Meto組降低心律失常評分和縮短心律失常出現(xiàn)總持續(xù)時間，與NS組和Sol組比較均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；NS組和Sol組比較無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；Api4組和Meto組比較無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。⑸芹菜

6、素各劑量組心肌細胞凋亡率明顯低于NS組（P＜0.05）；APi1、APi2、APi4能劑量依賴性地降低大鼠心肌缺血再灌注細胞凋亡率（P＜0.05）。⑹芹菜素各劑量組劑量依賴性地提高大鼠心肌缺血再灌注Bcl-2蛋白表達量（P＜0.05）、降低大鼠心肌缺血再灌注Bax和Caspase-3蛋白表達量（P＜0.05）。⑺芹菜素各劑量組與NS組比較，心肌組織損傷的病理學變化顯著減輕（P＜0.05）。⑻芹菜素各劑量組與NS組比較（P＜0.05），B

7、cl-2 mRNA表達量增加和Bax mRNA表達量減少均呈劑量依賴性。
　　 結論：
　　 ⑴芹菜素藥物預適應對在體大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用可能與其影響NO產(chǎn)生有關。
　　 ⑵芹菜素具有縮短大鼠再灌注心律失常持續(xù)時間，降低再灌注心律失常評分和細胞凋亡率，縮小大鼠缺血再灌注心肌梗死面積，進一步證明其對大鼠心肌缺血再灌注損傷具有保護作用。
　　 ⑶芹菜素抗大鼠心肌缺血再灌注細胞凋亡機制可能與其下調(diào)心