茭白黑粉菌人工接種雄茭技術(shù)體系的初步研究.pdf

1、分類號——UDC——IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIlY3432142學(xué)號密級埸H1大季YANGZHOUUNlVERSITY碩士學(xué)位論文(全日制專業(yè)學(xué)位)茭白黑粉菌人工接種雄茭技術(shù)體系的初步研究指導(dǎo)教師姓名：申請學(xué)位級別：論文提交日期：學(xué)位授予單位：耿園亟學(xué)科專業(yè)名稱：園藝2Q】璺生魚月論文答辯日期：2Q]璺生墨旦揚劌盤堂學(xué)位授予日期：2Q】旦生魚月呈Q旦2018年5月耿園：茭白黑粉菌人工接種雄茭技術(shù)體系的初步研究摘要茭白(Zi

2、zanialatlfoliaTurcz)是中國傳統(tǒng)的水生蔬菜之一，茭白黑粉菌(Ustilagoesculenta)是導(dǎo)致肉質(zhì)莖膨大的重要因素，茭白的孕茭機制、形成機理，黑粉菌對于單、雙季茭形成的影響，生產(chǎn)上容易形成的雄茭和灰茭的原因等問題尚不明確，這些問題嚴重制約了茭白優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)栽培的發(fā)展。為此，本研究以“YD一3”茭白為試驗材料，探索黑粉菌在其體內(nèi)的生長發(fā)育變化及分布位置、分離鑒定方法及適宜黑粉菌的培養(yǎng)條件，初步建立雄茭組織培養(yǎng)再生體系

3、及人工接種技術(shù)，試圖為黑粉菌影響茭白形成機理提供一些線索，為生產(chǎn)上單、雙季茭和雄茭、灰茭形成機理提供一定的技術(shù)基礎(chǔ)。結(jié)果如下：1、在茭白植株生長發(fā)育過程中，芽與苗期生長點、肉質(zhì)莖膨大初期、中期、中后期，商品期及成熟老化期適宜的脫水時間依次是5／12h、lh、2h、4h，8h和12h，能清晰地觀察到組織內(nèi)茭白黑粉菌的變化和分布過程；芽期是茭白黑粉菌的初始生長階段，肉質(zhì)莖膨大初期是黑粉菌形態(tài)變化最為劇烈的時期，商品期和成熟老化期分別是黑粉菌

4、的穩(wěn)定生長和孢子形成期，這兩個時期適合作為分離黑粉菌的材料；雄茭葉鞘中沒有黑粉菌，而正常茭葉鞘中含有黑粉菌菌絲，可以作為黑粉菌人工接種雄茭是否成功的驗證手段之一。2、用3％次氯酸鈉對整個茭白消毒4rain，再使用切片和孢子懸浮液涂布的分離方法可以成功分離出茭白黑粉菌，在鑒定過程中發(fā)現(xiàn)真菌通用引物ITSl和ITS4擴增黑粉菌的ITS58SrDNA不能特異鑒定出黑粉菌，選用茭白黑粉菌Laml6A和Pra2兩個基因片段設(shè)計了兩對特異引物，可特

5、異鑒定茭白黑粉菌；黑粉菌培養(yǎng)最適的培養(yǎng)基是PDA培養(yǎng)基，YEB不適宜培養(yǎng)黑粉菌。3、成功建立了雄茭組織培養(yǎng)再生體系，探索出組織培養(yǎng)過程中外植體適宜的消毒方法和最佳植物生長調(diào)節(jié)劑配方。外植體芽在清水沖洗2h后用01％氯化汞消毒8min，誘導(dǎo)、增殖和生根的最佳激素濃度配方依次是10mg／LIAA10mg／L6BA、1Omg／L24一DI0mg／L6BA和O5mg／LNAA，增殖系數(shù)為3505。4、初步研究了黑粉菌人工接種雄茭的技術(shù)體系，發(fā)現(xiàn)