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文檔簡介
1、大麥堅黑粉菌（Ustilago hordei）是一類引起大麥產生黑粉狀病穗的真菌，嚴重危害全球的大麥生產。本論文研究了大麥堅黑粉菌的生理特性及其侵染機制，建立了大麥堅黑粉菌的遺傳轉化體系，并對轉化相關因子作了優(yōu)化，獲得了如下主要結果：
1．用兩個真菌基因表達啟動子gpdA和hsp70分別替換質粒pCAMBIA1301中的35S啟動子，構建了真菌表達載體3XpgpdA-1301和3×phsp70-1301。然后進一步引入GF
2、P報告基因，獲得了載體3×pgpdA-1301-GFP和3×phsp70-1301-GFP。這四個載體均可用于大麥堅黑粉菌的遺傳轉化，其轉化子可通過載體上的潮霉素抗性基因或GFP進行篩選。
2．通過對影響大麥堅黑粉菌生長狀態(tài)條件因子如培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)基pH和培養(yǎng)基組成等的分析和優(yōu)化，確定了適合于大麥堅黑粉菌生長的較佳條件：溫度23℃，pH7.0。培養(yǎng)基組成對黑粉菌生長影響較小，低濃度碳源、氮源即可滿足生長，且鹽離子對生長影響
3、較小。
3．比較了PEG-CaC12法、電擊法和農桿菌介導(ATMT)法對大麥堅黑粉菌的轉化效率，明確ATMT法顯著優(yōu)于其他兩種方法。然后在ATMT方法基礎上，對影響其遺傳轉化效率的主要因子進行了優(yōu)化，得到優(yōu)化條件為：AS濃度200-400 mM，預培養(yǎng)時間12-18h，共培養(yǎng)時間48-72h。
4．通過觀察大麥堅黑粉菌體外配對、侵染擬南芥和大麥等寄主的過程，初步明確了其侵染機制及對寄主產生的影響。大麥堅黑粉
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