農(nóng)桿菌介導(dǎo)小麥成熟胚遺傳轉(zhuǎn)化體系建立和遺傳轉(zhuǎn)化研究.pdf

1、小麥?zhǔn)侵匾募Z食作物，利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)轉(zhuǎn)化小麥?zhǔn)沁M(jìn)行小麥遺傳改良的重要途徑。本研究以27份優(yōu)良普通小麥fTriticumaestivum L.)品種．(系)為試材，進(jìn)行成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)及分化再生培養(yǎng)，研究了愈傷組織形成及分化再生的影響因素對(duì)小麥成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)及分化再生能力的作用；利用篩選出來的農(nóng)藝性狀優(yōu)良、適合小麥成熟胚培養(yǎng)的小麥品系山農(nóng)2618進(jìn)行了成熟胚遺傳轉(zhuǎn)化試驗(yàn)，對(duì)農(nóng)桿菌介導(dǎo)外源基因轉(zhuǎn)化成熟胚愈傷組織的條件進(jìn)行了

2、研究。獲得以下主要結(jié)果： 1．通過對(duì)27個(gè)不同基因型小麥材料進(jìn)行成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)及分化再生試驗(yàn)，明確了小麥的基因型、成熟胚愈傷誘愈培養(yǎng)基2,4．D和NAA濃度是影響小麥成熟胚愈傷組織形成和分化再生的重要因素，確定了最佳誘愈的2,4-D和NAA濃度分別為2.0 mg 1<'-1>和0.5 mg 1<'-1>。篩選出12個(gè)適合小麥成熟胚培養(yǎng)和植株再生的基因型材料，建立了小麥成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)及分化再生體系，為小麥成熟胚遺傳轉(zhuǎn)化研究

3、奠定了基礎(chǔ)。 2.以普通小麥品系山農(nóng)2618為材料，對(duì)影響農(nóng)桿菌介導(dǎo)小麥成熟胚愈傷組織遺傳轉(zhuǎn)化效率的因素(侵染菌液的濃度、侵染時(shí)間、超聲波處理、真空處理等)進(jìn)行了試驗(yàn)，初步建立了農(nóng)桿菌介導(dǎo)的小麥成熟胚遺傳轉(zhuǎn)化體系。結(jié)果表明：菌液濃度和侵染時(shí)間對(duì)愈傷組織的存活和轉(zhuǎn)化效果具有明顯影響，在菌液濃度為OD600=0.8，侵染時(shí)間為60min時(shí)，抗性愈傷的獲得率最高，達(dá)到4.21％；在農(nóng)桿菌侵染過程中，運(yùn)用超聲波或真空輔助處理可以提高轉(zhuǎn)化