聚乙二醇-聚己內(nèi)酯共聚物膠束的細(xì)胞內(nèi)在化作用研究.pdf

1、近年來，兩親性嵌段共聚物膠束作為一種新興的納米藥物載體，逐漸成為藥物傳遞體系(DDS)的研究熱點(diǎn)。但是，關(guān)于膠束進(jìn)入細(xì)胞的具體機(jī)理的研究尚不充分。由于兩親性是形成嵌段共聚物膠束的先決條件，很有必要考察親疏水比例對細(xì)胞內(nèi)在化的影響。基于上述研究目的，本論文對聚醚-聚酯共聚物膠束的內(nèi)在化行為進(jìn)行了研究。
　　 首先，利用聚乙二醇單甲醚(mPEG)和ε-己內(nèi)酯(ε-CL)單體成功合成了四種不同親疏水比例的兩親性聚醚-聚酯嵌段共聚物，并

2、成功在末端接枝上了熒光探針異硫氰酸熒光素(FITC)。通過傅里葉變換紅外光譜(FT-IR)、核磁共振氫譜(1H-NMR)、凝膠滲透色譜(GPC)、X射線衍射(XRD)和臨界膠束濃度(CMC)的檢測結(jié)果可知，合成的嵌段共聚物具備了預(yù)期的化學(xué)結(jié)構(gòu)和性質(zhì)。更重要的是，接枝上FITC后并沒有對嵌段共聚物的成膠束的能力產(chǎn)生影響。
　　 其次，利用溶劑揮發(fā)法制備了四種不同親疏水比例的嵌段共聚物膠束及對應(yīng)的熒光標(biāo)記的共聚物膠束。接著用納米激光

3、粒度儀(DLS)、原子力顯微鏡(AFM)和酶標(biāo)儀等實驗儀器對膠束的粒徑、Zeta電位、形貌、穩(wěn)定性及體外毒性等性質(zhì)進(jìn)行了表征，結(jié)果表明不同親疏水比例的膠束具有相同的球形形貌，十分相似的粒徑和Zeta電位，以及良好的穩(wěn)定性和生物相容性。
　　 然后，選用NIH-3T3成纖維細(xì)胞對膠束的內(nèi)在化能力進(jìn)行了考察。由熒光顯微鏡和ImageProPlus6.0軟件得到的半定量的結(jié)果證明，在3個小時的培養(yǎng)時間內(nèi)，熒光標(biāo)記的膠束具有與FITC相

4、當(dāng)?shù)臒晒鈴?qiáng)度，從而說明化學(xué)接枝并不會影響FITC的熒光性能，而且膠束具備良好的內(nèi)在化能力。
　　 最后，重點(diǎn)考察了膠束通過內(nèi)吞作用進(jìn)入人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)或肝癌細(xì)胞(HepG2)的具體內(nèi)在化方式。利用熒光顯微鏡和ImageProPlus6.0軟件進(jìn)行了半定量分析，此外，利用流式細(xì)胞儀進(jìn)行了定量分析。結(jié)果顯示，親水比例高的膠束更容易進(jìn)入細(xì)胞;在HUVEC細(xì)胞中，細(xì)胞膜穴樣內(nèi)陷介導(dǎo)的內(nèi)吞和大胞飲作用表現(xiàn)出明顯的親疏水比例依