菠蘿蛋白酶對高速破片傷清創(chuàng)作用的實驗研究.pdf

1、目的：
　　 1.采用高速破片對兔、羊、豬的后肢肌肉軟組織進行致傷，建立一種局部傷情穩(wěn)定性高、可重復(fù)性好的高速破片傷動物模型，用于評價菠蘿蛋白酶對高速破片傷的清創(chuàng)療效。
　　 2.提出一種更為簡便的高速破片傷清創(chuàng)方法：切開傷道，在傷道內(nèi)局部使用菠蘿蛋白酶，開放引流并延遲縫合。在豬后肢軟組織高速破片傷模型中研究并證實菠蘿蛋白酶的清創(chuàng)療效。
　　 3.研究菠蘿蛋白酶對高速破片傷傷道微環(huán)境的改善作用，闡明其促進創(chuàng)傷愈合

2、的機制。
　　 方法：
　　 1.采用兔、羊各4只，分別為A、B組。豬8只，隨機平均分為C、D組。采用“五三”式滑膛槍發(fā)射球形破片（槍口速度約850m/s，質(zhì)量0.375g）致傷A、B、C組動物后肢軟組織，相同方法發(fā)射圓柱形破片（槍口速度約950m/s，質(zhì)量0.87g）致傷D組動物，通過觀察局部傷情、傷道組織病理分區(qū)、細菌量以及細胞因子水平，并分析各指標變異系數(shù)（CV）評價模型傷情的穩(wěn)定性。
　　 2.體外實驗中

3、，取正常肌肉組織和傷道內(nèi)失活肌肉組織，置于不同濃度的菠蘿蛋白酶溶液中。通過檢測組織失重和酶溶液中的總游離氨基酸釋放量，研究酶溶液的選擇性組織水解作用。體內(nèi)實驗中，取中國長白豬15只，高速球形破片致傷后隨機分為5組：手術(shù)清創(chuàng)組（E組）、傷道切開組（I組）、菠蘿蛋白酶清創(chuàng)組（B組）、傷道切開+菠蘿蛋白酶清創(chuàng)組（IB組）以及對照組（C組）。通過檢測傷道組織細菌量、組織病理學(xué)改變以及傷道愈合時間，評價各組的清創(chuàng)效果。
　　 3.取中國長

4、白豬12只，高速球形破片致傷后隨機分為3組：傷道切開組（I組）、傷道切開+菠蘿蛋白酶清創(chuàng)組（IB組）以及對照組（C組）。通過檢測傷道組織血流量、組織氧分壓、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）水平以及傷道愈合時間，研究菠蘿蛋白酶對高速破片傷傷道微環(huán)境的改善作用。
　　 結(jié)果：
　　 1.所有傷道均為單純軟組織貫通傷。B、C組傷道入、出口面積和傷道容積等局部傷情指標的穩(wěn)定性優(yōu)于A、D組。傷道組織病

5、理學(xué)觀察可見典型高速破片傷的組織病理學(xué)分區(qū)，其中C組的穩(wěn)定性優(yōu)于其他3組。細菌量檢測顯示傷道組織污染程度較重，各組間無顯著差異（p＞0.05）。傷道組織內(nèi)TNF-?和IL-6水平在傷后24h內(nèi)呈逐漸升高趨勢，血漿中TNF-?和IL-6水平變化與之類似，但整體水平低，一定程度上反映了創(chuàng)傷后局部及全身炎癥反應(yīng)程度。
　　 2.體外實驗中，在相同濃度的酶溶液條件下，傷道內(nèi)失活組織水解比正常組織更快，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p＜0.05）。濃

6、度為10mg/mL的菠蘿蛋白酶溶液可迅速水解傷道失活組織，對正常組織幾乎沒有作用。體內(nèi)實驗中，傷道切開+菠蘿蛋白酶清創(chuàng)組的傷道組織細菌量與手術(shù)清創(chuàng)組相當(dāng)，顯著低于傷道切開組、菠蘿蛋白酶清創(chuàng)組以及對照組（p＜0.05）。傷道切開+菠蘿蛋白酶清創(chuàng)組的傷道愈合時間也更短。
　　 3.在傷道切開+菠蘿蛋白酶清創(chuàng)組中，傷道組織血流量和氧分壓的恢復(fù)顯著快于傷道切開組和對照組（p＜0.05）。傷后48、72小時，傷道切開+菠蘿蛋白酶清創(chuàng)組的組

7、織TNF-α水平顯著低于傷道切開組和對照組（p＜0.05）。與其他兩組比較，傷道切開+菠蘿蛋白酶清創(chuàng)組的組織TGF-β含量也更高（p＜0.05）。傷道切開+菠蘿蛋白酶清創(chuàng)組的傷道愈合時間更短。
　　 結(jié)論：
　　 采用“五三”式滑膛槍發(fā)射0.375g，射速約850m/s 球形破片射擊豬后肢，建立的高速破片傷動物模型，傷情穩(wěn)定，可重復(fù)性好，適用于高速破片傷藥物清創(chuàng)的療效評估。
　　 菠蘿蛋白酶可有效水解、清除高速破