肺組織中水通道蛋白1和溺死的研究.pdf

1、目的:該研究的目的是尋找和建立一種準(zhǔn)確、科學(xué)和具有實(shí)用性的診斷溺死的方法,并用分子生物學(xué)的理論和技術(shù)對(duì)溺死的機(jī)制進(jìn)行研究.因?yàn)樵械姆椒ù嬖谝韵碌牟蛔愫蛦?wèn)題:1、檢驗(yàn)結(jié)果科學(xué)性不強(qiáng).不論是硅藻檢驗(yàn)還是花粉檢驗(yàn)方法,雖然從理論和實(shí)踐上都比較敏感和可行,但因空氣中存在花粉或硅藻,人體溺死前已受污染而出現(xiàn)假陽(yáng)性,亦可因機(jī)體內(nèi)這類異物含量很低,或在檢測(cè)過(guò)程中極可能遭破壞,以至于檢測(cè)不出,造成假陰性.2、目前對(duì)于溺死的形成機(jī)制不清楚,存在爭(zhēng)議,值

2、得進(jìn)一步深入研究.3、在研究方法上與其它醫(yī)學(xué)學(xué)科相比有一定的差距,大部分還在重復(fù)使用一些較老的化學(xué)和物理方法,創(chuàng)新不多,特別是運(yùn)用分子生物學(xué)方面的成果于溺死的研究方面還很少.4、目前對(duì)于實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果和溺死機(jī)制存在爭(zhēng)論,在法醫(yī)學(xué)實(shí)踐中主要是依據(jù)大體尸體征象進(jìn)行綜合分析后鑒定為是否溺死,這種鑒定方法不夠精確和仔細(xì),科學(xué)性較差,容易出現(xiàn)差錯(cuò).方法:該課題分為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和法醫(yī)臨床實(shí)踐初步運(yùn)用兩部分.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采用SD健康大鼠(四川大學(xué)華西醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)

3、動(dòng)物中心提供),實(shí)驗(yàn)分成溺死組、對(duì)照Ⅰ組和對(duì)照Ⅱ組,采用擲硬幣方法將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分入溺死組、對(duì)照Ⅰ組和對(duì)照Ⅱ組,溺死組動(dòng)物沉沒(méi)于常溫下的家用自來(lái)水中溺死,對(duì)照Ⅰ組和對(duì)照Ⅱ組均用股動(dòng)脈放血法處死,處死后對(duì)照Ⅰ組按溺死組一樣置入家用自來(lái)水中,對(duì)照Ⅱ組不與水接觸,分別記錄時(shí)間后取材.采用免疫組化、透射電鏡、免疫電鏡及RT-PCR方法對(duì)各組肺組織中水通道蛋白1的表達(dá)進(jìn)行研究.免疫組化結(jié)果在圖像分析系統(tǒng)下對(duì)表達(dá)陽(yáng)性部位進(jìn)行分析,數(shù)據(jù)以x±S表示,

4、所有數(shù)據(jù)均經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,用統(tǒng)計(jì)SPSS軟件進(jìn)行方差分析和q檢驗(yàn).免疫電鏡結(jié)果采用膠體金顆粒計(jì)數(shù),進(jìn)行半定量分析,用統(tǒng)計(jì)SPSS軟件進(jìn)行方差分析和t檢驗(yàn).RT-PCR方法在圖像分析系統(tǒng)下對(duì)瓊脂糖電泳分離后的凝膠成像進(jìn)行識(shí)別分析,數(shù)據(jù)以x±S表示,用統(tǒng)計(jì)SPSS軟件進(jìn)行方差分析和q檢驗(yàn).在法醫(yī)實(shí)際案件中評(píng)價(jià)AQP-1的作用.結(jié)論:該課題通過(guò)對(duì)大鼠溺死模型的AQP-1研究證實(shí):1、AQP-1定位在肺組織的Ⅰ型上皮細(xì)胞膜、支氣管上皮細(xì)胞和血管內(nèi)