GPR54基因C-816T和T-754C的多態(tài)性與牛性成熟關(guān)聯(lián)性研究.pdf

1、GPR54基因是牛性成熟狀的重要候選基因之一，本文選擇42頭安徽本地黃牛、44頭西門(mén)塔爾牛及其雜交育種群116頭作為試驗(yàn)群體，分析牛GPR54基因5’調(diào)控區(qū)的SNPs以及不同基因型啟動(dòng)子的啟動(dòng)效率和牛性成熟狀之間的關(guān)聯(lián)性。試驗(yàn)提取牛血液基因組后，通過(guò)測(cè)序鑒別SNP位點(diǎn)，雙熒光素酶報(bào)告基因驗(yàn)證其SNP位點(diǎn)對(duì)啟動(dòng)子效率的影響。結(jié)果表明：
　　1.GPR54基因的啟動(dòng)子區(qū)GPR973序列存在兩個(gè)SNPs位點(diǎn)，分別是距離CDS起點(diǎn)上游第8

2、16位和754位：C-816T和T-754C，西門(mén)塔爾牛和安徽地方黃牛分別只有1種基因型，西門(mén)塔爾牛的基因型全部為CCTT，安徽地方黃牛的基因型全部為T(mén)TCC，分析其單倍型結(jié)果顯示連鎖不平衡。
　　2.C-816T突變位點(diǎn)附近存在TCF-1和AP-3(2)轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)，T-754C附近及其本身存在TFIID、NF-1、CAC-binding_pro、TCF-1轉(zhuǎn)錄因子以及F位點(diǎn)等。從C-816T到T-754C形成一個(gè)以TCF-

3、1開(kāi)頭結(jié)尾的復(fù)合轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合區(qū)域，其中還包含一個(gè)TFIID結(jié)合的G/TATAAA盒。經(jīng)過(guò)預(yù)測(cè)，本目的片段含有一個(gè)從-878bp至-638bp的啟動(dòng)子區(qū)域。
　　3.通過(guò)雙熒光素酶報(bào)告基因驗(yàn)證了西門(mén)塔爾牛和安徽地方黃牛不同GPR973基因型的啟動(dòng)子效率，報(bào)告基因驗(yàn)證兩種單倍型的啟動(dòng)子存在明顯差異，其中-816CT-754啟動(dòng)子的效率要比-816TC-754提高34.31％（p<0.01）。
　　4.通過(guò)對(duì)不同品種牛GPR54進(jìn)