2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁(yè)
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1、黃瓜花葉病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)在番茄上造成的危害十分嚴(yán)重,可嚴(yán)重降低番茄的產(chǎn)量和質(zhì)量。本試驗(yàn)利用人工microRNA(artificial microRNA,amiRNA)技術(shù)使轉(zhuǎn)化的番茄具有對(duì)CMV的抗性。amiRNA技術(shù)在我國(guó)番茄抗CMV的育種研究中尚未見(jiàn)報(bào)道。將人工改造的植物microRNA(miRNA)轉(zhuǎn)入番茄體內(nèi),獲得的轉(zhuǎn)化番茄,對(duì)番茄抗病毒育種研究和miRNAs的研究與應(yīng)用具有重要意義。<

2、br>　　 本研究首先分析番茄中的miRNAs本底表達(dá)量,選擇表達(dá)量較高的miRNA159作為人工構(gòu)建miRNA的骨架。使用siRNA Target Finder設(shè)計(jì)靶標(biāo)基因?yàn)镃MV2a基因的的siRNA,并根據(jù)BLAST結(jié)果選擇一段與番茄同源性最低的片段,用其替換miRNA159的成熟序列,并將amiRNA159-2a連接于載體pBI121,獲得重組載體pBI12-amiRNA159-2a。通過(guò)農(nóng)桿菌EHA105的介導(dǎo)將重組載體pB

3、I121-amiRN159-2a,轉(zhuǎn)入番茄體內(nèi)。為了提高轉(zhuǎn)化的效率,對(duì)轉(zhuǎn)化體系的分化出芽激素、卡那霉素、脫菌素和生根激素等進(jìn)行篩選,建立了優(yōu)化的轉(zhuǎn)amiRNA159-2a番茄體系。將得到的經(jīng)過(guò)卡那霉素篩選的轉(zhuǎn)anaiRNA159-2a番茄再生苗進(jìn)行分子鑒定,分別用PCR擴(kuò)增和Southern雜交進(jìn)行分子鑒定,并獲得陽(yáng)性植株。獲得陽(yáng)性轉(zhuǎn)化子后,轉(zhuǎn)amiRNA159-2a番茄的再生苗接種Fny-CMV,進(jìn)行抗病性鑒定,結(jié)果表明轉(zhuǎn)amiRNA

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