飼用酵母菌的分離與鑒定及復(fù)合微生態(tài)制劑的研制.pdf

1、如今在畜牧業(yè)的生產(chǎn)過(guò)程中,動(dòng)物促生長(zhǎng)及疾病的防治很大程度上還是依賴(lài)于抗生素,可是抗生素帶來(lái)的負(fù)面影響也是日益突出,因此尋求新的、安全的制劑來(lái)取代抗生素已經(jīng)成為一種現(xiàn)實(shí)的需要。微生態(tài)制劑是通過(guò)改善宿主腸道菌群平衡而發(fā)揮益生作用的生物制劑,是實(shí)現(xiàn)安全、無(wú)污染、無(wú)藥物殘留的綠色畜產(chǎn)品的重要途徑。
　　 本次試驗(yàn)一共分離出8株酵母菌,并利用26S rDNA基因DI/D2區(qū)序列分析法對(duì)其酵母菌進(jìn)行了鑒定,得到了6株飼用酵母和2株毛孢子菌。

2、對(duì)其中的一株釀酒酵母進(jìn)行了生物學(xué)特性的研究。分別研究了酵母菌和枯草芽孢桿菌的發(fā)酵工藝,以及這兩株菌與乳酸菌的混合發(fā)酵工藝。優(yōu)化了冷凍干燥、噴霧干燥和烘干干燥三種工藝,并探討了三種工藝的優(yōu)劣。具體結(jié)果如下:
　　 (1)釀酒酵母50L發(fā)酵罐發(fā)酵條件為:接種量為5％(1.5L),發(fā)酵溫度設(shè)為30℃,通氣量為1.3 Nm3/h,攪拌速度為180rpm,添加3％泡敵,1％的豆油做消泡劑。在此條件下,發(fā)酵28小時(shí),釀酒酵母活菌數(shù)為1.42

3、×1011 cfu/ml。
　　 (2)采用單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)的方法確立了枯草芽孢桿菌的最佳發(fā)酵培養(yǎng)基配方為:蔗糖2％、豆粕2％、NaCl0.1％、MgSO40.02％、MnSO40.005％、KH2PO4\K2HPO40.3％:0.1％、0.02％CaCl2;發(fā)酵罐培養(yǎng)條件為:裝液量為60％、3L、接種量為1％、初始pH為7.0、溫度30℃、轉(zhuǎn)速180rpm、通氣比在1:0.3—0.5。在此條件下進(jìn)行的5L發(fā)酵罐發(fā)酵,活菌數(shù)

4、可以達(dá)到5.3×1012cfu·mL-1。
　　 (3)根據(jù)各菌種間的協(xié)同關(guān)系,初步確定了不同菌種混合發(fā)酵的工藝,發(fā)酵條件為:接種量為5％,發(fā)酵溫度為35℃,轉(zhuǎn)速為180rpm,接種次序?yàn)橄冉臃N釀酒酵母和乳酸菌,再接枯草芽孢桿菌。
　　 (4)酵母菌的冷凍干燥保護(hù)劑以脫脂奶粉10％+麥芽糊精5％為最佳,活菌數(shù)達(dá)到9.31×1010 cfu/ml,存活率為65.6％；乳酸菌和枯草芽孢桿菌以脫脂奶粉10％+蔗糖10％為最佳活

5、菌數(shù)分別為1.44×1011 cfu/ml和1.52×1011 cfu/ml,存活率分別為68.6％和82.6％。
　　 (5)噴霧干燥的進(jìn)風(fēng)溫度為160℃,出口溫度為77℃,以5％脫脂奶粉作為保護(hù)劑,制出的菌粉細(xì)膩,不發(fā)粘效果較好。各菌劑干燥結(jié)果為:釀酒酵母活菌數(shù)6.25×1010 cfu/ml,存活率為44.0％；乳酸菌活菌數(shù)1.16×1011 cfu/ml,存活率為55.2％；枯草芽孢桿菌活菌數(shù)為1.15×1011 cfu