湖北省雞源沙門氏菌的分離鑒定和耐藥性分析.pdf

1、沙門氏菌(Salmonella)是一種革蘭氏陰性桿菌，可以引起雞白痢、禽傷寒和禽副傷寒等沙門氏菌病，對我國養(yǎng)雞業(yè)產生了巨大威脅。同時，沙門氏菌也能感染人，引起嘔吐、腹瀉，甚至是敗血癥等，嚴重危害了人的生命健康。近年來，抗生素在動物養(yǎng)殖中的廣泛使用，導致了沙門氏菌多重耐藥性的出現(xiàn)，這不僅會加大沙門氏菌病的防治難度，也會引發(fā)嚴重的公共衛(wèi)生安全問題。本研究從湖北省24個縣市地區(qū)送檢樣品中分離和鑒定雞源沙門氏菌94株，并鑒定其血清型，通過藥敏試

2、驗和耐藥基因檢測，初步掌握了雞源沙門氏菌在湖北省內的分布情況以及其耐藥表型，并探討了分離菌株血清型與耐藥表型之間的關系以及分離菌株耐藥表型與其所攜帶耐藥基因之間的關系。研究結果有利于指導合理應用抗菌藥物，為雞源沙門氏菌病的防治提供理論基礎，同時為沙門氏菌引起的公共衛(wèi)生安全和農產品安全問題的研究提供基礎。
　　疑似菌株的分離鑒定和分型試驗通過觀察細菌形態(tài)、生化特征以及PCR特異性擴增完成對沙門氏菌的鑒定工作。94株分離菌株血清型試驗

3、結果為:A群有49株(52.2％)，均為甲型副傷寒沙門氏菌;B群有32株(34.0％)，其中28株(29.8％)為乙型副傷寒沙門氏菌，4株(4.20％)為鼠傷寒沙門氏菌;D群有13株(13.8％)，均為傷寒沙門氏菌。
　　沙門氏菌分離菌株的耐藥試驗94株沙門氏菌分離菌株以及參考菌株都具有多重耐藥性。其中對β-內酰胺類抗生素（頭孢哌酮、復方阿莫西林、頭孢噻吩、阿莫西林、苯唑西林、青霉素）、對氨基糖苷類抗生素（安普霉素、慶大霉素、大觀

4、霉素、卡那霉素、鏈霉素）、對氯霉素類抗生素（氯霉素）以及對磺胺類抗生素（復方新諾明、磺胺甲噁唑）的耐藥率最高均為100％;對氟喹諾酮類抗生素（依氟沙星、氟甲喹、奧索利酸）的耐藥率為46.3％-97.9％;對四環(huán)素類抗生素（多西環(huán)素、四環(huán)素）的耐藥率為52.6％-74.7％;其他類抗生素（呋喃妥因、多粘霉素E、紅霉素、林可霉素、泰洛星、普那霉素、夫西地酸、利福平、甲硝唑）的耐藥性為3.16％-100％。
　　沙門氏菌分離菌株耐藥基因

5、的檢測分別對94株分離菌株和參考菌株的DNA進行耐藥基因的檢測，包括2種β-內酰胺類耐藥基因（blaTEM、blaPSE）、8種氨基糖苷類耐藥基因(aadA1、aadA2、aadB、aacC2、aac(3)-Ⅳ、aph(3)-Ⅲ，armA、rmtB）、5種氟喹諾酮類耐藥基因(qnrA、qnrB、qnrS、qepA、aac(6)-Ib-cr)、4種四環(huán)素類耐藥基因(tetA、tetB、tetC、tetG)、3種氯霉素類耐藥基因（catA1

6、、floR、cmlA）以及3種磺胺類耐藥基因(sulⅠ、sulⅡ、sulⅢ)等25對耐藥基因。擴增結果表明耐藥基因blaTEM、aadA2、catA1、sulⅡ在95株沙門氏菌中均存在;另外，有71株(74.7％)沙門氏菌檢測出有tetA基因，有65株(68.4％)沙門氏菌檢測出有aadA1基因，21株(22.1％)沙門氏菌檢測出有qnrB基因。但耐藥基因aacC2、aac(3)-Ⅳ、aph(3)-Ⅲ、armA、qepA、aac(6)-

7、Ib-cr、tetB、tetC、tetG、floR、cmlA、sulⅢ在所有沙門氏菌中均未檢測到。
　　分析沙門氏菌的耐藥表型和其耐藥基因的檢測的結果，抗生素的耐受率的最大值與其耐藥基因檢出率的最大值相一致，即存在該類抗生素的耐藥表型，就能檢測出該類抗生素的耐藥基因，如沙門氏菌對氨基糖苷類抗生素的耐藥率范圍較大，對安普霉素(APR)的耐藥率為0，對慶大霉素(GEN)、大觀霉素(SPE)以及卡那霉素(KAN)的耐藥率為4.21％-9

8、.47％，但對鏈霉素的耐藥率高達100％（95株）。與該表型對應的耐藥基因的檢出率最大值為100％(aadA2、aadB)，但對armA、rmtB的檢出率為0。沙門氏菌對氨基糖苷類抗生素的耐藥率最大值與該類基因的檢出率最大值均為100％，同時氨基糖苷類抗生素的耐藥率最小值與該類基因的檢出率最小值均為0。
　　以上結果分析表明，第一，雞源沙門氏菌在湖北省各地區(qū)的分離率為9.52％，其中甲型副傷寒沙門氏菌在湖北地區(qū)最為常見;第二，所有