動(dòng)物性食品源沙門(mén)氏菌對(duì)抗生素和消毒劑的耐藥性研究.pdf

1、沙門(mén)氏菌(Salmonella)是國(guó)際公認(rèn)的食品衛(wèi)生和耐藥性監(jiān)測(cè)重要的指示菌，廣泛存在自然界，可以通過(guò)食物鏈傳播，并感染人和動(dòng)物，導(dǎo)致腹瀉，感染致病性較強(qiáng)的血清型時(shí)還能致命?？股厥穷A(yù)防和治療沙門(mén)氏菌等病原菌感染的重要手段，近年來(lái)由于抗生素的廣泛及不合理使用，食源性沙門(mén)氏菌對(duì)抗生素耐藥性增強(qiáng)。為了降低傳染的發(fā)生、阻止抗生素耐藥菌的進(jìn)一步危害，環(huán)境消毒控制成為控制病原菌傳播的主要措施，目前，季銨鹽類(lèi)(Quaternary Ammonium

2、 Compounds，QACs)消毒劑已被廣泛用于養(yǎng)殖、食品加工等環(huán)境的消毒，然而消毒劑使用的增多是否會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌對(duì)消毒劑的耐藥也成為眾多學(xué)者關(guān)心的問(wèn)題，已有報(bào)道發(fā)現(xiàn)抗生素可以與季銨鹽類(lèi)消毒劑共同耐藥，但目前國(guó)內(nèi)關(guān)于動(dòng)物性食品源沙門(mén)氏菌對(duì)消毒劑耐藥及與抗生素共同耐藥的研究報(bào)道較少。
　　本研究采集四川省肉類(lèi)樣品，分離沙門(mén)氏菌，并利用形態(tài)學(xué)、生理生化及特異基因進(jìn)行鑒定。按照CLSI推薦方法及判斷標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)用瓊脂稀釋法測(cè)定沙門(mén)氏菌對(duì)9種不

3、同抗生素、兩種季銨鹽類(lèi)消毒劑的MIC值，并應(yīng)用PCR方法檢測(cè)抗生素及消毒劑耐藥基因，分析沙門(mén)氏菌對(duì)消毒劑耐藥性與抗生素耐藥性之間的關(guān)系，并對(duì)沙門(mén)氏菌株進(jìn)行PFGE分型。本研究主要開(kāi)展了以下研究:
　　(1)動(dòng)物性食品源沙門(mén)氏菌的分離、鑒定
　　2013-2014年從四川省不同地區(qū)采集肉類(lèi)樣品327份包括:豬肉137份，雞肉91份，牛肉99份，利用選擇性培養(yǎng)基分離，invA基因檢測(cè)，鑒定出沙門(mén)氏菌163株(49.84％):豬肉

4、78株(56.93％)，雞肉46株(50.55％)，牛肉39株(39.39％)。沙門(mén)氏菌血清型最多的是德?tīng)柋吧抽T(mén)氏菌(Salmonella Derby)，鼠傷寒沙門(mén)氏菌(S.Typhimurium)，羅森沙門(mén)氏菌(S.Rissen)，分別占分離菌株數(shù)的28.22％，14.11％及11.66％。
　　(2)動(dòng)物性食品源沙門(mén)氏菌對(duì)抗生素的耐藥性
　　154株(94.48％)沙門(mén)氏菌對(duì)9種抗生素表現(xiàn)出不同程度的耐藥性，對(duì)土霉素和甲

5、氧芐啶的耐藥率最高。多重耐藥分析結(jié)果顯示，163株沙門(mén)氏菌中，71株(43.56％)為多重耐藥菌株，多重耐藥嚴(yán)重。各種耐藥譜型中，1-2耐菌株所占比例最大，其次為3耐，優(yōu)勢(shì)耐藥譜型分別為OTC-TMP和TMP。
　　(3)動(dòng)物性食品源性沙門(mén)氏菌對(duì)消毒劑的耐藥性
　　163株沙門(mén)氏菌對(duì)兩種季銨鹽消毒劑的MIC值較高，PCR擴(kuò)增5種季銨鹽類(lèi)質(zhì)粒型消毒劑耐藥基因，分析其與沙門(mén)氏菌抗生素耐藥性之間的關(guān)系。結(jié)果表明各消毒劑MIC范圍是

6、:BC，8-128 mg/L; CTPC，8-256 mg/L。QACs耐藥基因檢出率為:qacE⊿1(10.42％;17/163)，qacF(17.17％;28/163)，未檢出qacE、qacG、sugE(p)。所有抗生素耐藥菌中qacE⊿1、qacF檢出率高于抗生素敏感菌(p＜0.05）。
　　(4)動(dòng)物性食品源沙門(mén)氏菌PFGE分型
　　對(duì)163株沙門(mén)氏菌進(jìn)行PFGE分型。結(jié)果表明沙門(mén)氏菌可以分為41個(gè)基因型，沙門(mén)氏菌

7、污染與肉類(lèi)采集地點(diǎn)相關(guān)，部分同源性較高的沙門(mén)氏菌菌株中，抗生素耐藥譜型相似。部分菌株消毒劑耐藥基因與PFGE譜型相關(guān)。
　　本研究發(fā)現(xiàn)四川省動(dòng)物性食品源沙門(mén)氏菌污染情況較嚴(yán)重，菌株對(duì)抗生素的耐藥率及多重耐藥率較高，沙門(mén)氏菌對(duì)季銨鹽類(lèi)消毒劑具有較高M(jìn)IC值，消毒劑耐藥基因檢出率高，消毒劑耐藥基因qacE⊿1、qacF與抗生素耐藥具有顯著相關(guān)性。耐藥沙門(mén)氏菌來(lái)源與肉類(lèi)采集地點(diǎn)相關(guān)?？梢?jiàn)，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)動(dòng)物性食品源沙門(mén)氏菌污染及耐藥性監(jiān)測(cè)，并