安徽省部分豬場(chǎng)生豬沙門氏菌帶菌情況與耐藥性研究.pdf

1、沙門氏菌(Salmonella)是一類重要的食源性致病菌，在人類健康和畜禽養(yǎng)殖中引起嚴(yán)重的危害。近三十年來(lái)，沙門氏菌的耐藥性出現(xiàn)了明顯的增強(qiáng)，多重耐藥譜不斷增寬，為沙門氏菌病的預(yù)防和治療帶來(lái)了極大的困難。生豬作為沙門氏菌的主要貯藏宿主之一，在沙門氏菌的散播及其對(duì)食品的污染方面扮演著重要的角色。
　　 利用PCR與常規(guī)技術(shù)相結(jié)合的方法，對(duì)安徽省不同地區(qū)六個(gè)規(guī)模化豬場(chǎng)三個(gè)生長(zhǎng)階段臨床健康豬進(jìn)行沙門氏菌的分離鑒定。共采集直腸棉拭子樣品

2、540份，分離到沙門氏菌22株，檢出率為4.07％(22/540)。其中哺乳階段的檢出率為1.67％(3/180)、保育階段為9.44％(17/180)、生長(zhǎng)階段為1.11％(2/180)。在被調(diào)查的六個(gè)豬場(chǎng)中，以安慶地區(qū)豬場(chǎng)的檢出率最高，為18.89％(17/90)。22株沙門氏菌分離株分屬三個(gè)血清群，其中B群3株，E1群2株，F(xiàn)群17株。對(duì)15種抗生素的感受性試驗(yàn)中，22株沙門氏菌對(duì)羥氨芐青霉素和四環(huán)素的耐受率最高，均為90.9％，

3、而對(duì)頭孢曲松和頭孢哌酮最敏感，敏感率均達(dá)100％。耐4種以上抗生素的多重耐藥菌株占分離菌株的90.9％(20/22)，多重耐藥譜為AMX-TET-KAN-CHL-FFC。表明安徽省部分規(guī)?；i場(chǎng)不同生長(zhǎng)階段臨床健康豬不同程度攜帶有沙門氏菌，分離菌株耐藥性嚴(yán)重，多重耐藥率極高。大多數(shù)分離菌株屬于較少見的F群。
　　 運(yùn)用PCR技術(shù)檢測(cè)了沙門氏菌分離菌株的Ⅰ類整合子和19種耐藥基因。22株沙門氏菌有19株檢測(cè)出Ⅰ類整合子，檢出率為8

4、6.4％(19/22)。對(duì)基因組和質(zhì)粒DNA進(jìn)行19種耐藥基因檢測(cè)，分別共檢測(cè)出11種和8種耐藥基因。建立了氨基糖苷類耐藥基因三重PCR;氯霉素類耐藥基因三重PCR和四環(huán)素類耐藥基因兩重PCR方法。既提高了檢測(cè)效率，又保證檢測(cè)的靈敏度和特異性。從檢測(cè)的耐藥基因中選擇檢出率最高的aph(3)-Ⅱa為靶基因成功的建立了aph(3)-Ⅱa基因的熒光定量PCR方法，最低檢測(cè)度為8copies/μL。通過對(duì)22株沙門氏菌基因組DNA和質(zhì)粒上aph