合肥市寵物犬與犬糧攜帶沙門氏菌情況調(diào)查及耐藥性研究.pdf

1、沙門氏菌(Salmonella)是一種重要的人畜共患病原菌,廣泛地存在于人類、畜禽、寵物、各種食物等。寵物犬誤食被沙門氏菌污染的飼料后而引起感染,在與人類密切接觸的過程中,易將沙門氏菌傳染給人類。同時,人類在喂食犬時,也可以因直接接觸被污染的飼料而感染沙門氏菌,從而不斷擴大沙門氏菌的傳播范圍。寵物犬和犬糧作為沙門氏菌的貯藏宿主,在沙門氏菌的散播及其對人類的影響方面扮演著重要的角色。
　　為了解合肥市寵物犬和犬糧攜帶沙門氏菌情況,分

2、離菌株的藥物敏感性和耐藥基因攜帶情況,及耐藥基因mRNA的表達水平,本研究采集746份寵物犬肛棉拭子和404份犬糧樣品,利用PCR與常規(guī)技術(shù)相結(jié)合的方法進行沙門氏菌的分離鑒定,分別采用凝集實驗和K-B紙片擴散法確定分離菌株的血清型和耐藥表型,用PCR方法檢測耐藥基因,同時結(jié)合表型確證實驗鑒定產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)菌株;利用SYBRGreenI染料法建立flor基因和sul2基因?qū)崟r熒光定量PCR(Real Time PCR)

3、檢測方法,并用Real Time PCR方法分別對不同菌株flor基因和sul2基因的mRNA表達量進行測定和分析。
　　結(jié)果顯示,寵物犬犬肛棉拭子樣品中共分離沙門氏菌19株,陽性率為2.55％(19/746),腸炎沙門氏菌為優(yōu)勢血清型;犬糧樣品中分離沙門氏菌10株,陽性率為2.48%(10/404),德爾卑沙門氏菌為主要的優(yōu)勢血清型。在對20種抗生素的感受性試驗中,29株沙門氏菌對阿莫西林/克拉維酸、氨芐西林耐藥性最強,而對頭孢

4、西丁和磷霉素最敏感。具有多重耐藥性的菌株占分離菌株的31.03%,多重耐藥譜為AMC-AMP-SXT-DOX。共檢測出16種耐藥基因,其中以strA-B基因的檢出率最高,檢出率為37.93%;其次是blaPSE基因,檢出率為34.48%。結(jié)合表型確證試驗,鑒定出6株產(chǎn)ESBLs菌株。成功建立了flor基因和sul2基因SYBRGreenI熒光定量PCR檢測方法,最低檢測限度分別為102copies/μL和103copies/μL。對氟苯