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文檔簡介
1、沙門氏菌是全球范圍內(nèi)最重要的食源性病原菌之一,雞是其主要的感染來源,肉雞養(yǎng)殖場作為感染源頭,研究其流行性、耐藥性及分子分型對于肉雞養(yǎng)殖業(yè)及公共衛(wèi)生都具有重要意義。沙門氏菌的血清型達(dá)2500種以上,不同國家、不同地區(qū)乃至不同養(yǎng)殖場其沙門氏菌的流行情況也不同,本研究對北京地區(qū)肉雞場沙門氏菌的流行情況及其耐藥性和分子分型情況進(jìn)行了初步的研究。
針對目前沙門氏菌分離鑒定方法多種多樣及分離效果不一的問題,本研究首先采用不同血清型的沙
2、門氏菌對各種選擇性增菌液和選擇性培養(yǎng)基的組合進(jìn)行了篩選和比較,并選出了最適合進(jìn)行雞源沙門氏菌分離的組合方法。
根據(jù)北京地區(qū)肉雞養(yǎng)殖場的分布情況,本研究共從北京地區(qū)的19個肉雞場及屠宰場采集了1231份雞泄殖腔、卵黃囊及環(huán)境樣品,采用已經(jīng)確定的方法共分離鑒定出沙門氏菌106株。血清分型結(jié)果表明:不同養(yǎng)殖場沙門氏菌的流行性存在顯著差異(P<0.05);所分離的沙門氏菌以腸炎沙門氏菌和雞傷寒沙門氏菌為主;不同養(yǎng)殖場所分離的沙門氏
3、菌的血清型不一,但是同一養(yǎng)殖場中的優(yōu)勢血清型沙門菌一般在1~2種;肉仔雞卵黃囊分離株主要以腸炎和雞傷寒沙門菌為主,肉雞分離株沙門菌則以腸炎和爪哇安納沙門菌為主。
采用微量肉湯稀釋法對本試驗分離的106株沙門菌的耐藥性進(jìn)行了分析,并根據(jù)其耐藥情況進(jìn)一步對其相應(yīng)耐藥基因的攜帶情況進(jìn)行了研究。結(jié)果顯示,本試驗中的沙門菌分離株對多粘菌素E和大觀霉素的耐藥率最高,分別為88.68%和82.08%,對其余抗生素的耐藥率均低于20%,其
4、中對阿莫西林/克拉維酸最為敏感,敏感率達(dá)100%。不同血清型的沙門氏菌對抗生素的耐藥性不同,雖然兩種優(yōu)勢血清型沙門菌(腸炎沙門菌和雞傷寒沙門菌)對多粘菌素E和大觀霉素的耐藥率均較高,但是在對恩諾沙星、磺胺異噁唑和氨芐西林的耐藥性方面存在顯著差異(P<0.05)。多重耐藥主要集中在對多粘菌素E和大觀霉素的兩重耐藥方面。對大觀霉素、四環(huán)素和多粘菌素E耐藥的菌株用PCR方法進(jìn)行了相應(yīng)耐藥基因的擴(kuò)增,結(jié)果表明,大觀霉素耐藥菌株中aadA2基因的
5、攜帶率較低(1.15%),無aadA1基因;四環(huán)素耐藥菌株中tet(A)和tet(M)基因的攜帶率分別為71.43%和14.29%,多粘菌素E耐藥菌株中pmrA和pmrB基因的攜帶率分別為63.83%和73.40%,說明本試驗中的四環(huán)素和多粘菌素E耐藥沙門菌菌株的耐藥以主動外排作用為主。
采用核糖體基因分型(ribotyping)與脈沖場凝膠電泳(PFGE)兩種方法分別對本試驗中分離的同一血清型沙門菌進(jìn)行了基因分型研究。結(jié)
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