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1、UniversityCode:10225RegisterCode:S15748DissertationfortheDegreeofMasterBiocontrolandMolecularDiagnosisOfFusariumsolaniCandidate:Supervisor:AcademicDegreeAppliedfor:Speciality:Dateof0ralExamination:University:ShaYilaPaNax
2、iLiuXuefengprofMasterForestProtectionJune2015NortheastForestryUniversityAbstractTheelmisanimportantgreeningtreespeciesandafforestationspeciesinnorthemchinaandplaysahugeecologicalroleinsand—fixationanderosionpreventionInr
3、ecentyears,greateconomic10ssesandecologicaldamageshavebeencausedbythebandedelmbarkbeetleTherearenoefiectireandenvironmentallyharmoniousmethodstocontrolitasyetTherefore,lookingforthenonpollutionmeasurestopreventandcontrol
4、theplantdiseases,screeninganddevelopingnewmicrobialfungicidesforFusariumsolaniisveryimportantInthisstudywecollectedthediseasedelmsattaekedbyScolytUSschevyrewiinXinjiangUrumqiandHeilongjiangHarbinandattemptedtoisolateanta
5、gonisticmicrobethatCancontainFJDla船iandstudyonitsidentification,antimicrobialactivityoffermentationbrothandoptimizationofitsfermentationconditionsforoptimalinhibitoryeffectsInaddition,withthesDecificprimersdesigned,throu
6、ghthenestedPCRamplificationestablishedasetofEsolaniisfastdetectiontechnology1Fromthecollectedelms,microbeswereisolatedusingthetraditionalmicroorganismis01ationmethodsEsotaniwasusedasplantpathogentotesttheresistanceabilit
7、yoftheisolatedmicroorganismwithslidecultivationmethod,amongwhichthreestrainsshowedinterestedfeaturesFermentationbrothfiltraterescreeningresistanceabilityscreenlngeventuallyidentifiedoneoptimum,JN1,fromthethreescreenedstr
8、ainsJN1mostlyretardedthegrowthofEsolanimoldwiththerespectivesuppressingratesas534%2Combinedwithrelatedpapers,theevidencefromtheculturalperformances,morphologicalcharacteristics,physiologicalandbiochemicalfeaturesandthese
9、quencingandanalysisofits16SrDNAofJN1strain,weinitiallydefineJN1isBacillusmethylotrophicus3FermentationconditionoptimizationwascarriedoutusingsinglefactorandorthogonaltestsTheresuitsshowedthatthebasicculturemediumforJNlis
10、,anditgrowswellwithinitialpHwas70,fermentationtimewas54h,cultivationtemperaturewas28。C,androtatespeedwas180r/min4BasedondifferencesinITSsequencesofEsolaniandotherdominantspeciesoffungiassoeiatedwithSschevyrewiapairofspec
11、ies—specificprimers,F(xiàn)sal/Fsa2wassynthesizedTheITS—PCRmoleculardetectionforthetestedstrainshavedetectedbyspecificprimersFsal/Fsa2Theresultsshowedthat,DNAextractedfromFusariumsolanistrainprovidedasingle500bpamplicon,butDNA
12、extractedfromotherstainsdidnotamplifyusingtheseprimersInthestudythesensitivityofspecificprimersFsal/Fsa2hadexamined,indicatingthattheDrimerssensitivityforgenomicDNAdetectionisonthelevelof1fg/tLKeywordsTheelm,F(xiàn)usariumsola
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