肝素的提取精制和亞硝酸法制備低分子肝素的研究.pdf

1、跨西料技大學(xué)論文題目：肝素的提取精制和亞硝酸法制備低分子肝素的研究學(xué)科門類：工學(xué)一級學(xué)科：食品科學(xué)與工程培養(yǎng)單位：食品與生物工程學(xué)院碩士生：黃滿紅導(dǎo)師：宋宏新教授2016年5月肝素的提取精制和亞硝酸法制備低分子肝素的研究摘要肝素是一種由動物結(jié)締組織的肥大細(xì)胞產(chǎn)生的粘多糖，主要存在于豬小腸粘膜和肝、肺臟等組織細(xì)胞中。目前，我國主要以肉制品企業(yè)的副產(chǎn)物豬小腸粘膜提取肝素，大多小企業(yè)技術(shù)設(shè)備落后，缺乏專業(yè)技術(shù)人員，肝素產(chǎn)品良莠不齊，多以粗品肝

2、素的原料藥出口為主，提高產(chǎn)品質(zhì)量和加工精度，延長產(chǎn)業(yè)鏈提質(zhì)增效已迫在眉睫。肝素有很好的抗凝血作用，它是預(yù)防和治療深靜脈血栓形成(DVT)等血栓栓塞性疾病的首選藥物。肝素作為抗凝劑臨床應(yīng)用已有70多年，但由于其容易引起出血的副作用而限制其臨床應(yīng)用。而低分子肝素相比肝素有許多優(yōu)點(diǎn)，比如：在低水平抗凝作用時(shí)可以產(chǎn)生良好而持久的抗血栓作用、出血副作用小、血漿半衰期長等。但是我國目前對低分子肝素的研究仍處于初級階段，低分子肝素的使用主要依靠進(jìn)口。

3、因此本課題對肝素鈉的制備技術(shù)進(jìn)行研究，旨在改善傳統(tǒng)生產(chǎn)工藝，提高肝素產(chǎn)品質(zhì)量。同時(shí)研究亞硝酸法制備低分子肝素的工藝參數(shù)，為低分子肝素的生產(chǎn)提供一定的理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下：1肝素鈉效價(jià)的檢測研究。通過羊血漿法、生色底物法和天青A法測定了兩廠家的肝素鈉效價(jià)分別為：148U／mg和164U／mg，1455U／mg和1568U／mg，1455U／mg和1614U／mg。三種方法都能用于測定肝素鈉效價(jià)，且測定結(jié)果可靠，基本一致。在應(yīng)用中應(yīng)結(jié)

4、合實(shí)際條件和各方法的優(yōu)缺點(diǎn)進(jìn)行選擇。天青A法用于試驗(yàn)快速測定，另外兩種方法基于抗凝活性的檢測主要用于終產(chǎn)品藥效檢測。2粗品肝素鈉的制備研究。以肝素鈉效價(jià)、吸附率和肝素得率為評價(jià)指標(biāo)，研究了肝素鈉制備的酶解、樹脂的吸附和解吸三個(gè)關(guān)鍵步驟，分別考察了溫度，pH值、鹽濃度、時(shí)間等對于提取工藝的影響，在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上通過正交試驗(yàn)取得粗品肝素鈉制備的最佳條件是：a、酶解：小腸粘膜與提取液的料液比1：8，鹽濃度05mol／L，胰蛋白酶添加量01％

5、，酶解液pH值為88，酶解溫度60℃，酶解時(shí)間35小時(shí)。b、吸附：D254樹脂添加量28％、吸附溫度55℃，鹽濃度02mol／L，吸附液pH值85、吸附時(shí)間7小時(shí)。c、洗脫：洗脫液鹽濃度30mol／L、洗脫液pH值85、洗脫溫度45℃、洗脫時(shí)間35小時(shí)，洗脫2次。以此方法制備得到的粗品肝素鈉效價(jià)為83U／mg，得率212％，蛋白質(zhì)含量1926mg／g，產(chǎn)品色澤為淡黃色。達(dá)到了最終精制肝素鈉對原料的要求，并且產(chǎn)量穩(wěn)定高效，取得了滿意的效果