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1、目的：⑴對低分子肝素（Low molecular weight heprian，LMWH）的結構進行?；揎椧蕴岣咂淇鼓[瘤活性。⑵檢測酰化低分子量肝素（acyl-low-molecular-weight heparin, ALMWH）抗腫瘤活性。
　　方法：①固相反應法：將LMWH與吡啶按1:1重量比混合，加入酸酐，攪拌反應10h,在室溫，常壓，惰性氣體保護下，加無水乙醇終止反應。過濾、干燥得ALMWH（17＃、19＃）。稱取17

2、＃、19＃15mg用氘代重水溶解，干燥，重復3次。送作核磁檢測。②均相反應法：將LMWH溶于純水中。過柱子去雜質去除原料中雜質，收集洗液，堿化處理洗液后，加催化劑催化反應4h；乙醚萃取，去除油溶相后、濃縮，過凝膠柱。收集洗液，干燥后得ALMWH。用不同濃度ALMWH（0.05、0.15、0.5、1.5mg·ml-1)處理人乳腺癌MDA-MB-231細胞，48h后進行活細胞計數，計算抑制率。實驗重復三次。③以紫杉醇、LMWH為和不同濃度

3、ALMWH（0.05、0.15、0.5、1.5mg· m-1)處理人乳腺癌 MDA-MB-231細胞,給藥處理后24、48、72h進行活細胞計數，計算增殖抑制率。④以紫杉醇、LMWH為和不同濃度 ALMWH（0.05、0.15、0.5、1.5mg· m-1)處理人乳腺癌 MDA-MB-231細胞, Transwell法觀察對乳腺細胞的轉移能力的影響。⑤以紫杉醇、LMWH和不同濃度 ALMWH（0.05、0.15、0.5、1.5mg·m-

4、1)處理人乳腺癌 MDA-MB-231細胞,細胞劃痕實驗法觀察對乳腺細胞的遷移能力的影響。⑥裸鼠尾靜脈接種人乳腺癌MDA-MB-231細胞，不同濃度 ALMWH（100、200mg、400mg· kg-1)于接種前30min、接種后24h和以后間日腹腔給藥一次，20d后，斷頸處死裸鼠，甲醛固定肺組，石蠟切片、HE染色，光學顯微鏡下觀察腫瘤肺轉移灶。
　　結果：⑴固相反應法制備的ALMWH為白色粉末，pH3-4。1HNMR共振信號為

5、主要雙糖結構，GlcNS6S和IdoA2S的信號。H-1和H-2分別為GlcNS6S和IdoA2S一、二位甲基的吸收峰。不同濃度ALMWH（1.25、2.5、5、10mg·ml-1)處理MDA-MB-23148h的細胞增殖率分別為41％、86.9%、91.9%和99.6%。⑵均相反應制備的ALMWH系列產物為淺黃色或白色粉末，無味，易溶于水。GlcNS6S和IdoA2S的第1-5位H出現特征性ALMWH信號。用不同濃度的ALMWH（27

6、＃、29＃）（0.05mg、0.15、0.5、1.5·ml-1）處理人乳腺癌MDA-MB-231細胞48h后，細胞增殖抑制率依次為8%、19.4%、39.2%和58.9%。⑶均相合成的ALMWH（33＃）能明顯抑制MDA-MB-231細胞的增殖，且這一抑制作用隨著用藥劑量（0.05、0.15、0.5、1.5mg·ml-1）的增加及時間(24、48、72h)的延長而增強，用至與LMWH等劑量（1.5mg·ml-1）時，ALMWH對MDA-

7、MB-231細胞增殖的抑制作用明顯強于LMWH（P<0.05）。ALMWH和LMWH(24、48、72h）抑制率分別為56.2%和1.07%、60.6%和42%、95.9%和77.3%。ALMWH72h的抑制作用超過所選劑量(86μg·ml-1)的紫杉醇（ALMWH和紫杉醇抑制率為95.5%和90.0%）。⑷Transwell法檢測ALMWH可顯著（P<0.01）減少人乳腺癌MDA-MB-231細胞的穿膜數，抑制癌細胞穿膜侵襲的強度隨著

8、藥物劑量的增加而增強。⑸劃痕法檢測人乳腺癌MDA-MB-231細胞的遷移能力證明ALMWH能顯著（P<0.01）抑制人乳腺癌MDA-MB-231細胞遷移能力，且抑制強度隨劑量增加而增強。⑹人乳腺癌MDA-MB-231細胞裸鼠肺轉移模型ALMWH抗轉移活性檢測證明ALMWH對人乳腺癌MDA-MB-231細胞的裸鼠肺轉移具有明顯的抑制作用，表現為轉移灶數目的減少和轉移灶的縮小。
　　結論：①應用均相反應法制備的ALMWH合成工藝科學合