大鼠煙氣亞慢性暴露的生物學(xué)損傷效應(yīng)研究.pdf

1、目的：
　　吸煙和被動吸煙會導(dǎo)致心腦血管疾病、呼吸系統(tǒng)疾病、多部位惡性腫瘤等多種疾病的發(fā)生，為了弄清楚吸煙的致病機制，越來越多的研究致力于尋找暴露生物標(biāo)志物和效應(yīng)生物標(biāo)志物。本研宄擬通過對大鼠進行香煙煙氣亞慢性染毒，檢測暴露效應(yīng)指標(biāo)來評估機體早期生物學(xué)損傷效應(yīng)，分析早期生物學(xué)損傷效應(yīng)和煙氣暴露水平的劑量反應(yīng)關(guān)系。
　　方法：
　　(1)采用動式煙霧染毒裝置對Wistar大鼠進行香煙煙氣染毒。動物在恒氧、恒壓、恒濕、恒溫

2、和煙氣均勻的條件下自由吸入卷煙煙氣，進行全身暴露亞慢性染毒，建立動物染毒模型。（2)選用160只SPF級Wistar大鼠（c^m o a o克；180-220克，各80只）。隨機分組，分為低劑量組（LM，煙氣濃度10％)、中劑量組（MM、煙氣濃度20%)、高劑量組（HM、煙氣濃度60%)和對照組（C M)。香煙煙氣染毒3個月，各劑量組雌雄大鼠分別為15只，染毒時間30分鐘；香煙煙氣染毒6個月，各劑量組雌雄大鼠分別為5只，染毒時間30分鐘

3、（3)采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測大鼠尿液中可替寧的濃度。（4)取大鼠剩余左肺組織置于10%甲醛固定，病理分析。(5)右肺PBS清洗后，低溫保存，Elisa用于檢測各項炎癥指標(biāo)和氧化應(yīng)激指標(biāo)。(6)大鼠血清檢測血生化。
　　結(jié)果：
　　(1)與對照組相比，染毒組低、中、高劑量組對雄性大鼠體重趨勢影響差異顯著（P<0.001)，體重增長均低于對照組。（2)香煙煙氣染毒3個月，與對照組相比，雄性大鼠中、高劑量組心體比值差異顯著

4、（P<0.05);中劑量組腎體比值差異顯著(P<0.01)；雌性大鼠中劑量組肝體比值差異著（PC0.05)。香煙煙氣染毒6個月，與對照組相比，雄性大鼠中、高劑量組肝體比值差異顯著（P<0.05)。雌性大鼠中劑量組心體比值差異顯著（P<0.01);中劑量組肝體比值差異顯著（P<0.05)。(3)與對照組相比，低、中、高劑量組大鼠尿液中可替寧含量差異顯著（P<0.01)(4)血清檢測，與對照組相比，谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST)

5、、堿性磷酸酶（ALP)、甘油三酯（TG)、乳酸脫氫酶（LDH)有顯著差異（P<0.05)。（5)與對照組相比，谷胱甘肽(GSH)、丙二醛（MDA)、腫瘤壞死因子-a(TNF-a)、轉(zhuǎn)化生長因子_p(TGF-P)、白細(xì)胞介素-1(IL-1)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)差異顯著（6)病理結(jié)果與對照組相比，染毒組大鼠肺泡腔大小不均，部分肺泡間隔變薄或斷裂，都出現(xiàn)杯狀細(xì)胞不同程度增生，都可見明顯的炎癥細(xì)胞浸潤，并且隨著染毒劑量增加，肺部炎癥越來

6、越明顯。
　　結(jié)論：
　　(1)建立了大鼠香煙煙氣暴露亞慢性毒性動物模型，香煙煙氣亞慢性暴露對雄性大鼠體重增長趨勢影響顯著。
　　(2)隨著煙氣暴露劑量的增加，尿液中可替寧含量顯著上升，從而證明煙堿主要代謝產(chǎn)物可替寧的濃度能夠準(zhǔn)確反映煙堿及其他煙氣有害成分?jǐn)z入量，可以作為煙氣暴露的有效標(biāo)志物。
　　(3)本次實驗通過染毒組與對照組之間臟體比值、血生化檢測數(shù)據(jù)、肺部炎癥指標(biāo)、氧化應(yīng)激指標(biāo)的比較，發(fā)現(xiàn)香煙煙氣亞慢性染