基于SERS信號(hào)放大的微流控生物傳感分析方法的應(yīng)用.pdf

1、腫瘤標(biāo)志物在疾病早期，其相關(guān)活性分子的濃度很低，所以，利用核酸的高靈敏度檢測(cè)對(duì)于疾病的早期診斷和后續(xù)治療是非常重要的。本文將微流控生物反應(yīng)器技術(shù)與表面增強(qiáng)拉曼光譜相結(jié)合，其在生物分析領(lǐng)域中表現(xiàn)出的精確、快速、量少、選擇性好等特點(diǎn)，通過構(gòu)建靶替代循環(huán)和多功能智能探針發(fā)夾DNA引發(fā)的循環(huán)放大方法，利用納米金生物條形碼技術(shù)，準(zhǔn)確定量的對(duì)腫瘤標(biāo)志物miRNA-203進(jìn)行了檢測(cè)。本論文主要分為下面兩個(gè)部分的內(nèi)容：
　　1、將微流控生物反應(yīng)器

2、技術(shù)與表面增強(qiáng)拉曼光譜相結(jié)合，制作了一種聚二甲基硅氧烷(Polydimethylsiloxane，PDMS)/玻璃微流控生物反應(yīng)器，該芯片采用的是Ti-Au兩層同心圓型微生物反應(yīng)器，通過微注射泵、微管將DNA反應(yīng)液、細(xì)胞注入至芯片內(nèi)進(jìn)行反應(yīng)，待反應(yīng)結(jié)束，將反應(yīng)液移到檢測(cè)室內(nèi)，進(jìn)行拉曼光譜檢測(cè)。
　　2、基于表面增強(qiáng)拉曼光譜檢測(cè)技術(shù)，構(gòu)建了一種多功能智能探針發(fā)夾型靶向識(shí)別探針DNA循環(huán)放大SERS檢測(cè)miRNA-203的方法。本方法

3、主要以多功能智能探針發(fā)夾型靶向識(shí)別探針DNA、聚合酶、內(nèi)切酶以及攜帶有拉曼信號(hào)分子的納米金生物條碼探針為原料，設(shè)計(jì)了雙重循環(huán)放大模式（即靶替代循環(huán)和聚合酶鏈取代循環(huán)），其放大效率得到顯著提高。在優(yōu)化得到的最佳反應(yīng)條件下，此方法檢測(cè)miRNA-203的線性濃度范圍為1.0×10-14～1.0×10-7M，檢測(cè)限可達(dá)6.3fM（S/N=3），實(shí)現(xiàn)了miRNA-203的靈敏檢測(cè)。該方法操作簡便快速，靈敏度高，選擇性好，為表面增強(qiáng)拉曼檢測(cè)在生化