HIF-1α、VEGFmRNA在高脂膳食大鼠脂肪組織中的表達及有氧運動的干預作用.pdf

1、目的:采用動物實驗的方法,通過對高脂膳食大鼠Lee′s指數(shù),血漿IL-6、TNF-α以及脂肪組織HIF-1α、VEGFmRNA表達水平的分析,探討高脂膳食大鼠肥胖炎癥反應和脂肪組織局部缺氧狀態(tài)以及有氧運動的干預作用。
　　方法:健康清潔雄性8周齡SD大鼠40只,適應性喂養(yǎng)1周后,隨機分為普通膳食不運動組(A組)、高脂膳食不運動組(B組)、普通膳食運動組(C組)、高脂膳食運動組(D組)。進行6周有氧運動,第6周末禁食12小時后將大鼠

2、處死,解剖取腹部脂肪組織,置于EP管內(nèi)待測。心尖采血分離血漿待測。ELISA法測血漿IL-6和TNF-α,PCR法測脂肪組織HIF-1αmRNA和VEGF mRNA表達量, western blot法測脂肪組織中HIF-1α蛋白含量。運用SPSS11.5軟件處理測試所獲數(shù)據(jù)。
　　結(jié)果:
　　1.大鼠體重和Lee′s指數(shù)實驗期間均呈上升趨勢,至6周末4組均高于實驗前水平(P<0.05、P<0.01),與A組比較,B組明顯升高

3、(P<0.01),C組和D組間無顯著性差異(P>0.05);各組間比較,B組大鼠體重和Lee′s指數(shù)大于A、D組(P<0.01)。
　　2.脂肪細胞直徑B組、D組大于A組(P<0.01);B組大于A、D組(P<0.01);內(nèi)臟脂肪細胞重量B組、D組大于A組(P<0.01);B組大于A、D組(P<0.01)。
　　3.血漿IL-6水平,B組明顯高于A組、D組(P<0.05、P<0.01);血漿TNF-α水平,B組、D組與A組比

4、較明顯升高(P<0.05、P<0.01),B組明顯高于A組、D組(P<0.05、P<0.01)。
　　4.熒光定量PCR檢測HIF-1αmRNA,各組均檢測到約468bp的特異性條帶, B組、D組表達水平高于A組(P<0.05)。
　　western blot檢測HIF-1α,實驗各組均檢測到相對分子質(zhì)量93kDa的特異性條帶,B組、D組HIF-1α蛋白表達水平明顯高于A組。
　　熒光定量PCR測VEGFmRNA,各組

5、均檢測到約443bp的特異性條帶。B、C、D三組表達水平高于A組(P<0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.6周高脂膳食大鼠體重、Lee′s指數(shù)增加,血漿IL-6和TNF-α水平升高,大鼠發(fā)生肥胖和體內(nèi)炎性反應。
　　2.6周高脂膳食大鼠內(nèi)臟脂肪重量增加,脂肪細胞體積明顯增大,脂肪組織HIF-1α蛋白增加,局部呈缺氧狀態(tài);VEGF mRNA表達增加,脂肪組織對缺血缺氧環(huán)境呈適應性反應。
　　3.6周有氧運動大鼠血漿I